【求助】液体培养基优化浓度估算不准而造成平板计数失败

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标题:【求助】液体培养基优化浓度估算不准而造成平板计数失败

wwwh[使用道具]
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发表于 2015-6-25 14:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近一直在做液体培养基优化实验，所以要每隔一段时间就对培养基中的细菌数量进行统计，现在所用的方法是梯度稀释后涂平板计数，在操作中经常会出现浓度估算不准而造成平板计数失败的情况。
想请教下大家有没有什么好的细菌计数方法推荐！在此先行谢过！

wawa11[使用道具]
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发表于 2015-6-25 14:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

可以用血球计数器直接数或者取样用光度计测OD

QQ爱[使用道具]
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发表于 2015-6-25 14:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

1 平板计数
2 测OD值
3 血球计数板计数等方法都可以，但必须注意：菌体必须采用震荡器分散均匀，然后取样进行下步试验。否则以上任何一种方法获得的结果误差都很大！

妮子@[使用道具]
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发表于 2015-6-25 14:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

测OD值我试过很多次，现在的标准是参考大肠的浓度测定，在600纳米的波长下测定OD值为一时其菌浓约为10-9个，但是在其他浓度时我没发判定，
我自己也试过，梯度稀释的菌液在测OD值时其OD值不成规律，根本找不到逻辑性。你们要是有测过的能不能介绍下你们的方法，谢谢了！
血球计数板，这个东西没有用过。了解下先...

哈密瓜[使用道具]
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发表于 2015-6-25 14:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

测OD的方法需要制作浓度与相应OD值得标最曲线，此时同样需要别的方法对微生物进行计数。最简单的方法是血球计数板测定，但是细菌小观察计数费劲，其使用一般的微生物试验书都有介绍，简单，但需会用显微镜。我一般采用平板计数法测定微生物的数量（目标菌必须可以培养时）。

yayayu[使用道具]
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发表于 2015-6-25 14:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

血球计数板不适合活菌计数，按照楼主的描述，个人觉得最好还是用平板计数，这样得到的结果才能较充分说明菌体的生长情况。