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标题:【讨论帖】EB能否致癌?能?不能?你来说能不能?

园丁##[使用道具]
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【讨论帖】EB能否致癌?能?不能?你来说能不能?


EB,又名溴化乙锭。
英文全称:Ethidium bromide
分子式:C21H20BrN3
分子量: 394.3139 g/mol
熔点:260 - 262 °C
为芳香族荧光化合物,是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA、RNA。
EB能否致癌?
有人说能,他们防EB犹防洪水猛兽,避EB犹避瘟疫邪神;
有人说不能,他们裸手拿EB且闲庭信步,亦怡然自得;
众说风云,莫衷一是。
那到底能不能致癌呢?
又是如何致癌的?
口说无凭,以文为证!
有奖征集EB及其替代染料能否致癌的相关文献。请略加解读!
若没有文献支持,恐怕带在EB头上“致癌”的高帽要改成“待定”了……
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standbyme[使用道具]
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EB替代物究竟是什么成分?
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相关疾病:
染色体障碍


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edentry
EB替代物究竟是什么成分?

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GoldViewTM代替EB
GoldViewTM 核酸染料——使用说明
概 述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA,也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1. 将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
2. 加入5µl GoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡。
3. 冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4. 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1. 胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2. 加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。
3. 通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4. 虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
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jrwyyplt[使用道具]
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至于国内有公司宣称的新产品Goldview,我们不想多加评论。因为从极为相似的对比试验结果来看,该产品似乎就是AO(丫啶橙 ,一种剧毒产品,且荧光型号不佳))。
详见cuturl('http://www.ope-tech.com/doc/GelRed.asp') 。我记得以前有人讨论过所谓的Goldview的好处,结果很多人明白后都大骂卖这东西的公司,把个丫啶橙换个名字卖给国人赚黑心钱哦。
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bring[使用道具]
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铁定致癌啊!当年分光室被一牛人弄了满地EB,从此我再也没进去。
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kuaizige[使用道具]
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Health hazard
Ethidium bromide is a mutagen, suspected carcinogen and at high concentrations is irritating to the eyes, skin, mucous membranes and upper respiratory tract[citation needed]. The health effects of ethidium bromide exposure have not been thoroughly investigated. It is suspected to be carcinogenic and teratogenic because of its mutagenicity, although there is no direct evidence of either effect. The toxic effects of ethidium bromide may be experienced if swallowed, inhaled or absorbed through the skin. However, ethidium bromide is not easily absorbed through the skin because of positive charge and bulky structure.
The National Toxicological Program has published data [1] (this was current as of 08/08/2007) and an Executive Summary [2]. Both the data sheet and the executive summary note that ethidium bromide (under the name homodium bromide) has "some reported use as an antiparasitic & antiprotazoic drug in animals; has also been used as a drug or drug precursor." In the section Evidence for Possible Carcinogenic Activity of the Executive Summary it is stated that: "several early '70s studies reported that EB demonstrated antitumorigenic effects." In the Report on Carcinogens (11th Edition)[3], ethidium bromide is not listed in the body of the report but is listed in Table 1 with the testing status noted as "No additional testing".
Ethidium bromide is thought to act as a mutagen because it intercalates into double stranded DNA, thereby deforming the molecule. This is believed to block or trip biological processes occurring on DNA, like DNA replication and transcription.
from cuturl('http://en.wikipedia.org/wiki/Ethidium_bromide')
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H2O[使用道具]
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本人也认为EB可以致癌,我在跑电泳时,也是非常小心,带着手套操作。我们还是小心一些,尽管科研需要献身精神,但我们还是要保护好自己啊!
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xueyouzhang[使用道具]
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相关疾病:
锥虫病
应该有潜在致癌的风险,应该没有急性毒性.
在非洲至今仍有人使用EB肌肉注射治疗锥虫病,你说恐怖吗?所以很多时候是自已吓自已.
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bangqi_k[使用道具]
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怕死的人不适合做研究!仅此而已。
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小葵[使用道具]
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SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。
SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,SYBR Green I 与EB相比,诱变能力大大降低。
SYBR Green I 核酸染料特点
高灵敏:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
  信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
  操作简单:无须脱色或冲洗。
  适用范围广:可适用于多种电泳分析。
  使用方便:不影响其它修饰酶作用。
  经济:价格比银染便宜。
电泳用SYBR Green I 使用方法
SYBR Green I预染方法
1. 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
2. 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍,即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3. 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
4. 样品染色:向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5. DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
6. 上样、电泳:按常规操作。
SYBR Green I后染方法
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液,混匀,制成染色溶液。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
4. 用蓝盾TM观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾TM内观测。
SYBR Green I使用注意事项
1. 在"SYBR GreenⅠ预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。
3. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。
4. 在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
5. SYBR Green 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
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