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标题:【转帖】【分享帖】原代培养海马神经元经验

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发表于 2015-7-11 10:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【转帖】【分享帖】原代培养海马神经元经验


7天的细胞生长情况：神经细胞形态典型，胞体粗大，轴突相互交叉，突起成网络


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2015-7-11 10:55
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dog002[使用道具]
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发表于 2015-7-11 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
哎，怎么人家国外的基本全用Neurobasal系列？应该是神经元细胞专用培养基吧！
还有，国外一般都用番木瓜酶啊？我记得是，这个番木瓜酶还想是菲特异性的，偏好水解半胱氨酸巯基，不知对否？
另外，我想请教个问题啊，那个细胞冷冻复苏怎么弄啊，是不影响很大啊，因为我要出去做电生理实验，所以要经过这一步！
麻烦老大讲解一下！
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发表于 2015-7-11 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另外，你那缓冲盐和D-hank's用微孔滤膜抽滤行不？怎么要高压蒸汽灭菌嘛！
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dior[使用道具]
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发表于 2015-7-11 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哎，怎么人家国外的基本全用Neurobasal系列？应该是神经元细胞专用培养基吧！
对啊，neurobasal 就是专用啊，gibco公司有的啊，以前好像是用DMEM/F12
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发表于 2015-7-11 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 dior 于 2015-7-11 10:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

哎，怎么人家国外的基本全用Neurobasal系列？应该是神经元细胞专用培养基吧！
对啊，neurobasal 就是专用啊，gibco公司有的啊，以前好像是用DMEM/F12

re：Neurobasal是好啊，可是贵啊，DMEM/F12完全可以代替的……
原代组织分离个人感觉，机械分离的作用好些
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发表于 2015-7-11 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 dog002 于 2015-7-11 10:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

另外，你那缓冲盐和D-hank's用微孔滤膜抽滤行不？怎么要高压蒸汽灭菌嘛！

无机盐缓冲液，高压灭菌操作简单、效果彻底……
微孔滤膜主要用于活性物质（血清、培养基等）的灭菌
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发表于 2015-7-11 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

小伙子 还挺专业啊， 我们的培养方法基本相同，只是我感觉阿糖胞苷几乎不起作用。
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发表于 2015-7-11 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
专业，哈哈，谈不上……如果对细胞的纯度要求不大的話，我觉得阿糖胞苷可以不加，无血清高糖的培养液本身有利于神经元的生长。
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发表于 2015-7-11 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

re：Neurobasal是好啊，可是贵啊，DMEM/F12完全可以代替的……
原代组织分离个人感觉，机械分离的。
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发表于 2015-7-11 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
小伙子 还挺专业啊， 我们的培养方法基本相同，只是我感觉阿糖胞苷几乎不起作用。

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个人觉得加了阿糖胞苷还是很有用的，我是接种48小时加阿糖胞苷，加上24小时就能很明显看出细胞有变化，板子里变的很干净。是不是你用的浓度不够呢？
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