PCR仪

我认为最好的在线引物设计软件 [转自 丁香园论坛]


看到版上经常还是有许多战友为引物的设计感到头疼。不过这也难怪，虽然原理我们都知道，但是设计的时候却未必能都考虑的很完全。
在这里我向大家隆重推荐一个在线的引物设计软件，是斯坦福大学的，我认为是最好的在线引物设计软件，我用它设计接近100多对引物，可以说是屡试不爽。它用起来也很简单，最重要的是效果非常好，考虑的因素也非常的多。
先不说那么多了：网址：cuturl('http://seq.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer')
下面我继续图示。

点击“submit”进入下面的页面。
其中在Select YES to Amplify a region with EXACT endpoints of the DNA sequence entered NO YES这一项中，一定要选择yes，其他的各项目，大家可以点击查看说明，也都是非常的好理解。暂时，我们先不要改软件自设的默认值，直接submit

[ 本帖最后由 小鼹鼠 于 2011-8-13 16:42 编辑 ]

可是我的基因出来的是这种结果怎么办？
Primers for PCR

There were 1 forward primers in the valid range for GC content.
There were 4 reverse primers in the valid range for GC content.
There were 1 forward primers in the valid range for melting temperature.
There were 0 reverse primers in the valid range for melting temperature.

ERROR
The Tm range was too stringent, no primers were found in that range