PCR仪

的确比较奇怪。你倒是不妨先将PCR产物拿来跑个电泳，看是否有正常的扩增产物~~~~~~~~~

扩增条件还可以，解链时间还行，应该能够解链充分的。

是不是你realtime仪器程序设定有问题，理论上不应该出现这种情况。

如下~~~~~~~~~~~~~~~~：

1. 目的产物的溶解温度不详，建议你将溶解温度提高到99度来做，很有可能在90多度出现正常的解链峰。

2.目的产物的纵坐标跨度为0.01~0.08，相对于内参基因的0~0.5来讲这个范围其实是比较小的，在这种“放大”溶解曲线中很有可能出现怪异的曲线。如果将纵坐标变成0~0.5，这个倒着的小峰可能看起来就不那么明显了。

3.正如你说的，目的产物的量很少，这有可能是导致纵坐标跨度范围小的原因。建议你增加模板的量，减少引物的使用量（0.2uM each，可以在一定程度上增加PCR反应的特异性），或者换一种扩增效率稍微高一点的Mix试试，可能会好一点。