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标题:2%以上浓度的琼脂糖凝胶中气泡怎么消除？

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发表于 2011-8-23 15:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

2%以上浓度的琼脂糖凝胶中气泡怎么消除？

2%以上浓度的琼脂糖凝胶中气泡怎么消除？ [转自 丁香园论坛]


2%以上浓度的琼脂糖凝胶中总有气泡，怎么消除这些气泡呢？有经验的战友给点建议吧！谢谢！  
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@木木@[使用道具]
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发表于 2011-8-23 15:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是用国产胶，国产胶会有比较多的气泡，不过第一次煮胶时煮久一些气泡就会少一些，还有倒胶时的温度高一些倒，万一有气泡可以带上一次性手套赶。
试试吧，祝实验顺利
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发表于 2011-8-23 15:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢！我用针头很难将气泡赶出来。进口胶。
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发表于 2011-8-23 16:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
呵呵,介绍我刚学到的经验,在把胶刚融好的时候,还没有加入EB时,加少许无水乙醇,效果挺好的,我在铺3%的琼脂糖凝胶经常应用.
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发表于 2011-8-23 16:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的经验是加EB后，震荡要均匀，然后放置片刻就可以了！
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阿拉蕾[使用道具]
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发表于 2011-8-23 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1.溶胶后尽量减少搅动，自然冷却
2.60-70度加入EB，不能太凉，轻柔晃动瓶子，然后静置片刻
3.倒胶时从放在一个平面物体上，轻柔减少振动，
4.胶槽刷干净，减少摩擦。
有了气泡挽救的办法抽气和煮沸，都不常用，
关键是前面的。
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发表于 2011-8-23 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的经验:
1.胶瓶要干净,有条件尽量用蒸馏水冲洗几遍后,用电泳液冲洗.
2.溶胶要溶透,有时候表面上看胶已经沸腾了,但是仔细看胶里面有透明小颗粒,说明胶还是没透,此时铺胶依旧会有气泡.
3.加入EB后,不要剧烈晃动胶瓶,会产生大量小气泡,很麻烦.(可以胶温度高点加入EB,晃动过大也不会产生气泡,但是EB会挥发,小心)
4.产生大气泡,可以用枪尖挑破或拨到胶盒边缘,不影响电泳即可.以我的经验,即使产生很多小气泡也不怕,胶凉到一定温度,气泡会自然消失.不会影响凝胶.
本人铺胶超过400块,以上是点小经验,和大家分享~~~~~~~~~
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阿拉蕾[使用道具]
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发表于 2011-8-23 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1.可以在微波炉内调至解冻按钮 ,而非中高火或高火,时间设置为5-6分钟即可;
2.胶瓶并非要十分干净才行,每次大概在煮好后静置几分钟,待温度冷却到60-70度左右用棉手套取出,加上6-8UL的EB溶液,后均匀倒入电泳槽中,发现在孔中或周围有大气泡可用小枪头赶一下,即可.
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发表于 2011-8-23 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
将倒胶的瓶口贴着要倒入的托板，让胶液顺着托板壁缓慢流入就行，还是不要温度太高，EB会挥发！
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明天的明天[使用道具]
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发表于 2011-8-23 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
溶胶的时候分成两个瓶子装，最后再合成一瓶，还有就是 到完胶之后要是有气泡赶紧用镊子或者其他东西把气泡弄破！祝你好运！！！
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