PCR仪

举例如下：根据你合成报告单上的说明（生工）附注中所示每OD的引物加XXul的缓冲液配成100uM的储存液。假如我的合成报告单上附注，每OD的引物加55ul的缓冲液配成100uM的储存液,而我的PCR体系要求引物浓度是2.5uM，那我先稀释4倍，就是加220ul的水到干粉（稀释前要离心，使干粉到管底），然后再每次用时，再拿其中的一部分，分装稀释10倍就可以了

注意引物最好不要多次冻溶，这样易降解。如果试验中发现引物效率降低，既以前p的很亮，现在不亮了，要重新配置引物，减少实验耽误时间。如果发现引物二聚体明显，可以考虑在高温条件下把引物煮一下！

回答很全面

您所说的缓冲液是指什么？是指溶解引物的吧？一般都是用超纯水或者TEbuffer来溶解，不要用DEPC水，DEPC水呈弱酸性，oligoDNA容易在酸性溶液中降解，不利于保存，我们都是用灭菌的双蒸水溶解，溶解前干粉离心，让干粉沉在管底，加溶液后振荡混匀，保存一年都还可以使用，使用前充分溶解，关键是双蒸水不要偏酸和不要反复冻融，最好将大管分装成几管使用。

不能用DEPC水，因为PCR反应是在弱碱性条件下进行的。
我建议先用PH=8.0的TE溶解成100uM的母液，用时在根据需要稀释成5-10UM。

融解引物的话使用超纯水就足够了（按照我们实验室的习惯，将超纯水装瓶子里灭菌后使用），不需要用DEPC水。因为DNase的稳定性远不如RNase，只要高温处理就可以灭活。
当然如果引物是反转录中cDNA第一链合成时使用，或者一步法RT-PCR就需要使用DEPC水。不过如果cDNA第一链已经合成了，用这个cDNA作为引物跑PCR的引物不需要用DEPC水，因为此时已经不需要担心RNA降解了。

对于一般引物融解方法，个人比较同意楼上 岸上的鱼 战友的说法。DNA在酸性条件不稳定，引物降解对PCR效率影响很大的。