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标题:谈核酸染料，最佳EB替代品

岸上的鱼[使用道具]
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发表于 2011-8-24 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谈核酸染料，最佳EB替代品

谈核酸染料，最佳EB替代品 [转自 丁香园论坛]


对于这个问题，实验室一直在讨论，各种核酸染料各有优缺，到底应该选择哪一个实在是个让人头疼的问题！

因为工作需要，我们室的核酸电泳量相当巨大，每天都要不停的跑啊跑。。所以对这个EB替代品问题就比较关心，基本上市面上的所有核酸染料都买来试过了。

其实做核酸电泳 替代EB的主要原因无非两条：
1 保证对身体低危害；
2 在不影响EB的效果的前提下，可以更加稳定，敏感度更高，以适应高精确度的实验

以这两条原则为准绳，我们做到现在，只有两个产品可以达到 sybr green ,和 gelred
无论是危害性，实验效果都可以达到要求。
但是鉴于实验室已经被污染，并且这两个产品的价格要比EB高出许多，所以现在仍然在使用EB。
想立刻更换EB替代品，希望大家根据自己的经验，给些建议，师弟在此不胜感激！
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岸上的鱼[使用道具]
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发表于 2011-8-24 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
补充一个小知识，AO又称丫叮橙，剧毒致癌物质，也可以做DNA和RNA电泳。它在做双链DNA电泳时呈现绿色荧光，单链则为红色荧光。

现在有不少国内EB替代品就是用AO(丫叮橙)为原料，实验效果虽然不如EB，这个暂且放在一边不说，就是毒性也够吓人的！无是从健康角度还是实验效果而言都无法与EB媲美！
希望大家谨慎选择，剧我所知，国内的EB替代品，核酸染料全是用AO丫叮橙调制！

因为所有的染料我都用过，这些国内的EB替代品，它们跟AO丫叮橙的实验结果惊人的相似！大家不妨都拿来试用一下看看结果。

在毒性认证这方面我可以说我们应该很重洋媚外！

没有人愿意拿自己5年甚至10以后的身体健康来做赌注
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羊咩咩[使用道具]
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发表于 2011-8-24 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们实验室刚用sybr green 替代EB，可能是刚用条件不是摸的透彻，跑出的不如EB漂亮。
请问你们使用sybr green 的步骤？
不是要预染10MIN，染长时间有影响吗？
实验室开空调，是否影响胶浓缩时间？
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阿拉蕾[使用道具]
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发表于 2011-8-24 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不如eb漂亮，有时候还不准，跑一组，条带都成锯齿了，不过比ＥＢ敏感多了，用核酸染料染的也可以用凝胶成像仪看，也可以拍，
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阿拉蕾[使用道具]
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发表于 2011-8-24 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
电压越高，条带越乱，有时候会误认为是非特异性扩增，后又跑下ＥＢ，发现是目的条带，现在还没想出为什么
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阿拉蕾[使用道具]
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发表于 2011-8-24 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不同公司的sybr现在效果差别很大！产品相当乱。
建议大家可以试试 gelred ,各方面效果都很出色，还可以免费试用的，不过不知道现在还发不发免费装
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发表于 2011-8-24 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 岸上的鱼 于 2011-8-24 10:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
补充一个小知识，AO又称丫叮橙，剧毒致癌物质，也可以做DNA和RNA电泳。它在做双链DNA电泳时呈现绿色荧光，单链则为红色荧光。

现在有不少国内EB替代品就是用AO(丫叮橙)为原料，实验效果虽然不如EB，这个暂且放在一边不说，就是毒 ...

看来以后接触goldview还是小心点好
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发表于 2011-8-24 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Ｇｅｌｒｅｄ是哪家公司买呢？价格多少？
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何去何从[使用道具]
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发表于 2011-8-24 11:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
天根又推出了一个叫GeneGreen的染料,说是属于花青类染料,比EB毒性低,无致癌性,灵敏度比EB高10倍.紫外发射绿色荧光.拿了个试用装.不知道是不是楼上所说的AO(丫叮橙)?
gelred价格是很高啊,将近一千块了.  
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岸上的鱼[使用道具]
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 小中大
只要有上边所说的那个特性就应该是丫叮橙了，所以建议大家谨慎操作
gelred价格是比较高的，奢侈的实验室才用的起了，不过送我们的试用装还没用完呢  
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