小中大我帮忙翻译一下吧,不对之处还请各位战友指正。该段原文见文章图1下文字。
翻译:
应用ΔΔCT法,目的基因和参照基因的扩增效率必须大体一致。可以用一种灵敏的方法,该方法是通过检测模板梯度稀 释时的CT值变化,来评价两者是否有相同的扩增效率。图1 是cDNA在100倍稀释范围之内的实验结果。每一个稀释梯度的cDNA,c-myc和GAPDH都用特异性的引物和探针检测。由此得到c-myc和GAPDH的平均CT值以及ΔCT (CT,myc- CT,GAPDH)值。cDNA稀释倍数的log值与ΔCT值的曲线图见图1 。如果该曲线的斜率接近1,说明目的基因和参照基因扩增效率是相似的。ΔΔCT法也能够被使用。如图1所示,该曲线的斜率示0.0471,因此斜率接近1的假设成立,ΔΔCT法也可能可以用于分析这些数据。假如两者的效率并不一样,分析就应该通过绝对定量的标准曲线法进行。也可以重新设计引物或优化条件使得两者扩增效率达到相同。
备注:
需要平均CT值,看来每个稀释梯度也是需要同时做几个样本的。
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辛苦了,但我想矫正其中的一点笔误,那就是只有当斜率接近0时才能表明几个相关基因的扩增效率基本一致或相似。