小中大DNA电泳有的人为什么加水?
加水是为了上样到加样孔里后使样品均匀,跑出来的条带更好.因为电泳液在电泳一段时间后水分会蒸发,从而导致电泳液的离子强度增大,影响了电泳液的缓冲能力,因此适当的加一些双蒸水以弥补损失的水分。 电泳有时候只是为了标定浓度的。
2、在高浓度的胶上我的电泳图像呈弧形,有的还有锯齿状的条带。这是什么原因呢?
胶没灌好,导致胶孔不整齐或裂缝.解决方法很简单,拔梳子之前用一个塑料吸管吸取一些电泳槽的缓冲液,沿梳子的两侧冲一冲,缓冲液再流回电泳槽,然后拔梳子,这时候的胶孔真的是整整齐齐.
基因组DNA电泳出现很宽连在一起的条带,原因?测基因组DNA电泳浓度,两个DNA样本分别稀释了3个不同浓度,与原样本一共8份样,浓度最大的是50ng/ul,最小的是0.5ng/ul,加样5ul。设定80V,250mA,40min,电泳开始后电泳槽表面从两极开始出现很多小气泡,呈白色泡沫状,电泳结束时我的胶几乎都被泡沫给覆盖了。在紫外灯下看到的是一片很宽的带,所有的泳道荧光都混在了一起。理论上这些样本应该荧光强度不一,但结果却全部混在了一起。
1),你1个月前抽提的DNA,反复冻融5-6次对DNA影响不大。
2),你的胶块中可能有杂质或气泡导致带型不整齐
3),TAE电泳缓冲液的缓冲能力有限,电泳槽两端PH发生剧烈变化,很可能是导致 这样结果的主要原因。
4),电流250mA 太高了,80V40mA左右