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苯并(a)芘残留检测——高效液相色谱法（二）

关键词：浊度标准物质  熔点标准物质  食品安全检测  食品安全快速检测
4.仪器工作条件
①紫外检测器(波长287 nm)。
②流动相[甲醇+水(75+25)]。
③柱温30℃。
④流速1.5 mL／min。
⑤十八烷基硅烷(ODS)反相柱。
⑥进样量100／~L。
5.检测步骤
准确称取100 g样品于圆底烧瓶中，加2 tool·L-1NaOH的甲醇水溶液(9+1)200 mL，加热回流3h，移入分液漏斗中，用环己烷200 mL洗瓶并入皂化液于分液漏斗中，振摇，静置，分层，水层放入另一分液漏斗中，用环己烷100 mL分2次提取，合并环己烷，加甲醇水溶液(1+1)提取，弃甲醇水层，再用水200 mL，分2次提取，弃水层，环己烷移人旋转蒸发仪蒸发瓶中，浓缩至40 mL，移入分液漏斗中，用少量环己烷洗瓶并人浓缩液于分液漏斗中，加稀H。S04(6+4)50 mI，，分2次提取，去H2S04液，水洗环己烷至中性。将环己烷通过40-60目玻砂漏斗，加硅胶6 g，用环己烷10 mL湿润，上面加少量无水NazSO2过滤于旋转蒸发仪的蒸发瓶中，浓缩到2 mL。将浓缩液移至SephadexI。H一20 10 g柱内，用异丙醇洗脱，弃去前50 mL，收集50~150 mL分段洗脱液于旋转蒸发仪蒸发瓶中，蒸发至干，残渣用甲醇0.5 mL溶解，移入2 mL刻度试管中，甲醇定容至1 mL，取100~L注入HPLC仪(同时做空白试验)。
6.标准曲线制备
用PAH化合物标准溶液系列100gI。分别注入HPLC仪，以PAH含量(ng)为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
CH：y=2.8059x+0.3686，r=0.9998。
B(j)F：y=7.9428x+0.2846，r=0.9998。
B(K)F：y=3.1759x+0.0758，r=0.9987。
B(e)P：y=1.0636z一0.4810，r=0.9997。
B(a)P：y=1.3918z一1.3007，r=0.9997。
DMB(a)A：y=1-0277x+0.3851，r=0.9972。
I(1，2，3一cd)P：y=2.9095x+3.9261，r=0.9978。
7.计算
X = S×1000 / [m×(V2/V1)]
式中：
X——食品中PAH含量，ug·kg-1
S——样液峰面积查标准曲线对应量，ug；
m——样品质量，g；
V1——样品浓缩体积，mL；
V2——进样体积，mL。
8.说明
①本法也可用荧光检测器，激发波长365~384 nm、发射波长400~446 nm；流动相可用乙腈+水(70+30)；色谱柱可采Nucleasil C18 4.6 mm×200 mm。
②多环芳烃化合物的分离色谱图见图20一7。