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标题:【求助】内参actin、GAPDH你用哪个?

xue258[使用道具]
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【求助】内参actin、GAPDH你用哪个?


实验室内参一直用Actin,但看见园子里有人说GAPDH更稳定。今天试了一下GAPDH,感觉同样的模板量,actin要亮很多。不知道战友们RT-PCR内参怎么选择的,
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H2O[使用道具]
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Actin和GAPDH没有太大区别,actin mRNA 在各种细胞都比较丰富,如果你觉得actin模板要量很多,我建议你优化一下条件,并确定你扩出的是不是真的 actin片段。
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bs4665[使用道具]
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最常用的就是β-actin呀
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dog002[使用道具]
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内参基因的选择已经争论了很久,但一直没有什么定论。但如果只是要做定性分析,倒是无所谓。都可以用,个人习惯问题罢了。但是如果做到关于促进细胞增殖等基因,尤其是半定量分析时,其实各种内参基因都有各自的问题,只能根据文献选择在特定细胞内、特定状态下较稳定的内参基因用了。
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49888[使用道具]
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植物我一般用tubulin
植物最常用的actin在烟草中对基因组也能扩增
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am10[使用道具]
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主要考虑的是内参与你目的条带大小的关系,其他没啥特别的。
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remenb[使用道具]
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在细胞处于应激、缺氧、糖代谢紊乱时最好使用actin,实验室有人做缺氧时用了GAPDH做内参,结果编辑社以此为理由给拒了,理由很简单,GAPDH是三梭酸循环途径中的一个酶.因此上述的状态可能会改变此酶的表达和活性。
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在细胞处于应激、缺氧、糖代谢紊乱时最好使用actin,实验室有人做缺氧时用了GAPDH做内参,结果编辑社以此为理由给拒了,理由很简单,GAPDH是三梭酸循环途径中的一个酶.因此上述的状态可能会改变此酶的表达和活性。

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那心脏组织蛋白也可以用actin吗?有坛友认为心肌不是骨架蛋白,不能用actin。好像是这样说的。不知道测心脏和脑组织中的HIF-1α的内参到底用actin还是GAPDH,还请前辈多多指教,谢谢前辈~
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junhun[使用道具]
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在细胞处于应激、缺氧、糖代谢紊乱时最好使用actin,实验室有人做缺氧时用了GAPDH做内参,结果编辑社以此为理由给拒了,理由很简单,GAPDH是三梭酸循环途径中的一个酶.因此上述的状态可能会改变此酶的表达和活性。

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第二次见到,一直记得
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