小中大【求助】 关于蛋白纯化的求助
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最近在做中蛋白的纯化, 由于上样液比较粘稠,而导致上样后填料结块、堵柱等问题,做小试的时候通过0.45ul的膜过滤后可以上样,但是过滤速度极慢,不适合放大。另外,该蛋白由大肠杆菌表达,然后由包涵体变性溶解,再没切得到的短肽。所以上样液中含有融合蛋白等大分子物质,导致上述问题。之前试过离子交换(source 30Q),不过滤可以直接上柱,但由于收率低,后面换用反相层析发现不过滤的话不能上样。 想请问大虾们有没有什么方法可以降低上样液的粘度。感激不尽!