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标题:请教：高保真酶

purrr[使用道具]
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发表于 2011-9-15 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教：高保真酶

请教：高保真酶 [转载]


哪位同仁可以指点一种实实在在高效、保真的DNA合成酶，至少能扩4kb。一定要有实战经验的，这将决定我下一笔专款的去向，我已经为此付出不少代价-----money and Time！
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喵咪[使用道具]
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发表于 2011-9-15 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
TAKARA
pyrobest 保真性相当于pfu,扩增4-5kb
LA taq，保真性高于Taq,低于pyrobest,扩增10kb
扩增能力是我们验证过的，保真性也没出过问题
这些酶比其他进口酶便宜
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purrr[使用道具]
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发表于 2011-9-15 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
pyrobest扩增3kb没扩出来
LA Taq保真性实在是太差，最近扩1-3kb的东西都出现错误，做表达实在是勉强  
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森林木[使用道具]
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发表于 2011-9-15 14:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
pyrobest 我们还没有测到过突变，曾经成功扩增4-5kb ，但也有2-3kb扩增失败的例子，但这种酶的产量和扩增能力确实不错。影响PCR的因素很多，长片段扩增对反应条件要求更苛刻。
LA taq扩增的东西我们没有测过序，但这种酶的产量和特异性不错。  
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purrr[使用道具]
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发表于 2011-9-15 15:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢森林木，可是我却受阻于此......觉得invitrogen和MBI的酶怎么样?
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森林木[使用道具]
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发表于 2011-9-15 15:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
都不错，各个实验室习惯不同，这些酶价格也不同
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