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标题:【讨论帖】做树突状细胞的同行们请进来，互相交流

ukonptp[使用道具]
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发表于 2015-9-11 11:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】做树突状细胞的同行们请进来，互相交流

大家好，我要做的课题与DC有关，欢迎大家到这里进行交流，呵呵，主要是想向大学多多学习！

[ 本帖最后由 ukonptp 于 2015-9-11 11:31 编辑 ]
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tudou85[使用道具]
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发表于 2015-9-11 11:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也在养,如何分离是关键,我快没有脾气了!!!
用骨髓培养成功的请来一下,救命!!
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langlang[使用道具]
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发表于 2015-9-11 11:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家好，我也是做树突状细胞培养，上周预定的白介素4和树突状细胞相关抗体刚到货，不知被谁动了手脚，一夜间毁于一旦，几千块的试剂全毁了，好心痛，目前实验无法开展，课题经费有限，再预定时间上也紧迫，不知哪位好心人有富裕试剂可购买，不胜感谢！！！
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langlang[使用道具]
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发表于 2015-9-11 11:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

既然大家都养树突状细胞，不妨把自己遇到的麻烦以及培养中的心得写出来，有问题大家讨论，好的经验一起分享，如何？
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发表于 2015-9-11 11:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不好意思,请教一个问题,第三张照片是不是树突状细胞的免疫荧光照片,其中绿的红的,哪个才是树突状细胞?
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发表于 2015-9-11 11:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是做DC的，分离骨髓单个核细胞，我用胎牛血清培养，不过成纤维细胞较多，无血清培养很不成功。希望交流经验。我的e-mail:dys9872@sima.com.cn 不知各位用何种细胞因子，剂量如何，可否交流一下
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发表于 2015-9-11 11:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得用骨髓培养，选择病人也比较重要，若骨髓细胞过多、过稠，不易分离，我一般用10ml-15ml骨髓，加入淋巴细胞分离液时，一定要注意分离液的温度，不能过低，分离时间可以稍长一些，15-20分钟2000转/分。
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发表于 2015-9-11 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也培养DC细胞，从外周血分离单个核细胞，在细胞因子的作用下分化诱导DC，才刚刚开始就遇到麻烦，分离的东西杂质太多，根本都找不到细胞了，艾，这是什么原因？希望各位多多指点！
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发表于 2015-9-11 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也做ＤＣ，请问国内哪里体外培养ＤＣ比较成功？
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49888[使用道具]
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发表于 2015-9-11 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你说的杂质是不是有很多比iDC小的细胞？我初步怀疑它们是血小板。。。
拿到monocytes后，用PBS洗时可以尝试减小离心速度（我用的1200 rpm，不过还得看具体的离心机^^）；即使这样做，虽然干净很多，但好像还是很难除净（也可能是我还没找到合适的速度）。。。导师建议我下次做的时候，先让monocytes贴壁4小时，然后洗去不贴的细胞，说不定会更好^^
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