小中大1. 慢病毒感染目的细胞,需要在安全柜内进行操作,若实验室只有超净工作台的话,则进行病毒操作的时候需要关掉风机。另外,操作完毕后所有与病毒接触的枪头、EP管等废弃物需要84消毒液浸泡处理。
2. 拿到慢病毒后,一般用带荧光标记的慢病毒进行感染预实验,需要设置一系列的MOI梯度,比如可设置MOI 1~100,2~2.5 倍梯度就可以了。MOI摸索的时候在96孔板内进行就可以了,这样也可以省些病毒。细胞以合适的数目接种到96孔板内,根据你预设的MOI值及病毒的滴度值,计算出每孔需要加入的病毒量(可梯度稀释)。感染的时候大部分细胞需要加入polybrene以增强感染,你可以先网上查下你要做的细胞系感染时能否加入polybrene。