小中大1 适用范围
适用于牛奶、奶粉等乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测。
2 样品准备/提取
2.1 牛奶、原料乳等液态 奶制品
(1) 称取2 g样品，加入2 mL乙腈，涡旋混合1 min；
(2) 再加入4 mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min；
(3) 取上清液4 mL，作为上样液待净化。
2.2 奶粉等固体奶制品
(1) 称取2 g样品，加入5mL水，涡旋混合2min，样品与水充分混匀；
(2) 加入5 mL乙腈，涡旋混合1 min；
(3) 再加入10 mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min；
(4) 取上清液5 mL，作为上样液待净化。
3 SPE柱净化——ProElutTM AFT 黄曲霉毒素检测专用柱1500 mg/12 mL（Cat.#65904）
(1)活 化： 10 mL乙腈，流出液弃去；
(2)上 样： 将上样液加入柱中（流速控制每滴/两秒），接收流出液；
(3)洗 脱： 10 mL乙腈洗脱（流速控制每滴/两秒），收集流出液。合 并步骤（2）、（3）流出液；
(4)重新溶解： 在40℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至大约2 mL，向旋蒸瓶中加入5 mL无水乙醇，继续减压蒸馏完全干燥；
(5)衍 生： 依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸，旋好玻璃塞充分混匀衍生液，45℃静置10 min。然后挥干衍生 液，用10%乙腈水溶液定容至0.5 mL。
4 分析条件
色谱 柱： Diamonsil C18（2），250×4.6 mm，5μm（Cat.#99603）
流 速： 1.0 mL/min
检测器： 荧光检测器，Ex:365 nm；Em:435 nm
柱 温： 30℃
进样量： 20 μL
流动 相： A：水； B：异丙醇+乙腈=3+2
梯度设置
时 间/min 0 5 15 20 21 30
A% 90 80 80 60 90 90
B% 10 20 20 40 10 10
