液相色谱

最近使用一台德国产诺尔液相色谱仪，检测器smartline 2500，泵smartline 1000，做过多个品种出现类似问题，就是重复性差，比如做盐酸利多卡因注射液含量测定，对照品面积分别为（1）61.104、（2）56.105、（3）56.070，而供试品峰面积：（1）36.358、（2）33.408、（3）33.359等数值，高和低者相差有10%，但是供试品与对照品的比值为：（1）0.5950、（2）0.5955、（3）0.5950倒是非常接近，并且不止这一个品种有这个问题，不知大家有没有遇到过这种问题，这是什么原因？怎样解决啊？

做了标样差距那么大，还有必要做样品吗？比值又是怎么回事？我认为与仪器关系不大。
因为您只是说了结果，也没说一下具体仪器的情况，那我试着分析一下可能性。
1如果阀没漏，检测器氘灯能量没减弱的话，我想问题出在进样阀和检测器的可能性不大
2你的仪器买多久了？泵没出现什么大问题吧？柱塞杆、密封圈如果没问题的话，那泵头部分就不漏液。如果流速、压力正常，那泵就没问题
3我估计可能有三方面
一 色谱柱你用多久了，有没有杯污染过，另外就是流速变化太快，柱子填料受损，中间有空隙。
   你是否换另外一根柱子测试过。
二 试验方法建立的如何，有没有国标、药典参考，流动相配比、化合物的灵敏度、进样浓度都是变化因素。
三 你进样量多少？定量环体积多少？如果不完全进样，那问题也可能出现在这里。
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您前后6个测试数据的产生顺序是样的，说说看？比值如何得来？

很明显第一针偏大，试着进第四针看看。进样前多跑个空白或者多平衡一下系统试试啦。

当然要同一个样品测了，感觉你这情况不是很复杂，仔细排查一下你的实验情况（5M+1E），应该很容易找出原因。

灯是很重要的一个方面,很有可能是灯的问题.
你的仪器我没用过,不知道你的液相上有没有R瓶(用于自动进样器洗针的)有的岛津和Waters液相当R瓶中无液体后重现性就会变差

我猜测一下，楼主的进样顺序应该是进一针标准然后进一针样品的吧

最近我有个同学也是用国产液相做课题，条件不变只是相隔一两天重复做，重复性都很差的。分析各种原因得出国产仪器很难值得信任

这样太打击用国产液相的操作者了

这仪器是德国进口的，有45年高效液相经验，他们做得最牛的仪器是蒸汽压力渗透仪和模拟移动床，还生产世界上最小的高压泵

对照和供试都有这样的问题：第一个的值稍大，后两个差不多，可能原因：仪器有一个稳定的过程，测第一个值时仪器未稳定，后变两个值，仪器比较稳定了，所以用液相检测，仪器一定要想用流动相冲洗半个小时到一个小时，在进样，而且第一个样品先测一个已知浓度的样品，以确定仪器是否正常。另外还有一个可能原因是楼主的洗脱条件设置的问题，必须保证每一次进样的条件是一样的，尤其是每次进样前的条件的，要是连续进样就都连续，要是中间有用流动相冲柱的时间，就都设定一样的，笔者曾经因为这个问题，而出现第一次实验有峰第二次进样却没峰的结果。
  提醒楼主提问时一定要把问题产生的情况说清楚点，以便大家对症下药。2，楼主试着连续5-6次在相同条件下测定同一样品，看仪器的重复性如何。