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标题:【求助】重组生物制品问题

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【求助】重组生物制品问题


各位战友,我们有个进口重组生物制品,在三级细胞库的建立过程中均没有用到抗生素,但是在后续的“有限代次生产”和“连续培养生产”中,均用到了青霉素和链霉素。请问这样可以吗?如果可以,在原液/半成品/成品的检查中,是否需要添加“抗生素残留”的项目?具体加在哪里呢?原液还是成品?
附上相关法规信息:
我在中国药典2010年版,第三部的凡例中看到:除另有规定外,生物制品的生产中严禁使用青霉素或其它β内酰胺类抗生素;
CFDA在2009年的“关于进一步规范生物制品质量控制要求的通告”中,也有相同的规定。
另外,在中国药典2010年版,第三部附录的“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程”中,提到,“用于生物制品细胞制备过程中不得使用青霉素或其它β内酰胺类抗生素”。请注意,这里是“细胞制备过程中”,而不是“生产过程中”。
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生产更严格,不得使用;
除另有规定外,生物制品的生产中严禁使用青霉素或其它β内酰胺类抗生素;
解读:菌种活化需要抗生素筛选的在种子培养阶段可以使用,但是在发酵培养中不得使用,就这么简单。
对于动物细胞培养防止染菌方面,种子制备要是不得使用,那生产上更不得使用。
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非常感谢您的解答!我想再向您详细描述下我们的细胞培养过程,您再帮我确认一下,可以吗?(因为我们这个产品属于进口产品,在国外已经上市多年,如果要改变生产工艺,涉及的工作就太多了,呵呵)
“从工作细胞库取细胞,复苏,用方瓶传代培养(青霉素链霉素),然后滚瓶培养(生长阶段,青霉素链霉素),然后滚瓶培养(生产阶段,青霉素链霉素),并获得细胞培养液,最后经过浓缩纯化,获得原液。“
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应该采用无菌工艺,而不是加入抗生素。
至于工作量大小,不是官方考虑的问题。
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kuaizige[使用道具]
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抗生素虽然减少了可以观察到的细菌、酵母等微生物的污染机会,却会增加支原体、病毒等隐性污染的机会。
因为细胞培养中污染主要来源于空气中的微粒和汽雾,而这些微粒和汽雾可以同时携带支原体、病毒和其他微生物。当抗生素使用时,可见污染被抑制而隐性污染又没被注意到,这样支原体、病毒等隐性污染的机会反而增加了。Barile的一项研究显示(1),72%持续使用抗生素培养的细胞有支原体污染,而不使用抗生素培养的细胞支原体污染的比例只有7%。
反过来如果不使用抗生素,支原体、病毒的污染往往会伴随细菌和酵母等的污染。由于细菌和酵母等的污染很容易观察到,污染细胞的及时清理就大大减少了支原体、病毒的污染机会。
潜在的支原体、病毒的污染会带来很大的危害。这些微生物的存在会影响细胞的理化性质,从而使研究者得到错误的实验结果。在严重的情况下,甚至使一个实验室数年的研究白白浪费。
由于过滤技术的提高和超净台质量的改进,在规范的细胞培养操作过程中引进污染的机会已经被大大降低了。所以比较合理的建议是,在常规的细胞培养中不要使用抗生素。只有在培养污染源很多(比如组织培养),或者培养非常珍贵的细胞株时才使用抗生素。
刚从百度上拷贝的,感谢楼主提出非常有价值的问题。
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kuaizige[使用道具]
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准备下班了,谁有兴趣的继续深挖一下:
Barile的一项研究显示(1),72%持续使用抗生素培养的细胞有支原体污染,而不使用抗生素培养的细胞支原体污染的比例只有7%。
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kuaizige[使用道具]
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有人帮找文献吗?


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summerxx[使用道具]
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准备下班了,谁有兴趣的继续深挖一下:
Barile的一项研究显示(1),72%持续使用抗生素培养的细胞有支原体污染,而不使用抗生素培养的细胞支原体污染的比例只有7%。
用于生产的细胞的一般不加抗生素同时在级别更高的洁净区里操作,而做cell based assay的细胞可加抗生素对环境要求低一些,环境/操作人员的差异是否也可以解释这个现象。
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summerxx[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 kuaizige 于 2015-10-12 10:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

有人帮找文献吗?

文献数据库有全文,试了下没权限。可以通过文献求助论坛下载,不过估计花费较多
应该是下面这个章节吧
全文地址:
cuturl('http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780122618505500118')
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用于生产的细胞的一般不加抗生素同时在级别更高的洁净区里操作,而做cell based assay的细胞可加抗生素对环境要求低一些,环境/操作人员的差异是否也可以解释这个现象。

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如果要是加上抗生素容易隐藏污染,那就是检测类也不适合加抗生素
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