小中大我用的是“上海华舜”的试剂盒（关键是开始做的时候，想找个便宜的练练手）。他们的TRNA的试剂盒有多种，我的体会是最好不要选用吸附柱的那种，因为没法看到沉淀的RNA，反正我是做了一个多礼拜都没成功，后来换了他们的TRNA抽提盒Ⅳ，一天后搞定。（好像有做广告的嫌疑哦，就此打住）
下面说说的我的步骤。
1 TRIZOL 1000ul分装在2个1.5ml的离心管中。（TRIZOL和组织的比例因不同的组织而不同，我的是肝脏，一般是50mg：1ml，我用的是一种类似于小棒槌的捣碎棒，开始没经验，一开始就把1000ul的TRIZOL放在一个管中，这样肝组织容易漂起来，不好捣碎，后来把TRIZOL 分开装，组织就很好捣碎，迅速捣碎组织后，在加上另一管中的500ul的TRIZOL，继续匀浆。置于冰上，继续下一个标本。所有标本都匀浆后同时进入下一个步骤。（开始的时候不知道50mg是多少，每次都是傻傻的去秤，后来熟练了也就省调这一步了。所以大家可以在做之前，找相同的组织，秤秤看你要的重量大概是多少，多秤几次，有了概念后，到了做时，就不需要秤组织了，这对于防止RNA降解非常有好处）
2 置5min后加入氯仿200ul，颠倒混匀。杂质含量多的组织，可先高速（10000-12000g\min,4℃,下同）离心5min后取上清液，在加氯仿，但会少量减少TRNA的得率。
3 静置10min后高速离心10min。
4 小心的吸取上层液，不要碰到中间白色的层和最下层的氯仿（否则，影响TRNA的纯度，如果碰到，则重新离心）
5 加入取得的上层液一半的异丙醇（体积），混匀。在加入异丙醇相同体积的RNA沉淀液。（有些含粘蛋白多的组织如肝脏需要加入这种RNA沉淀液，至于这是什么东西，我也问了他们公司，竟然说是商业秘密，晕，不过后来我嫌麻烦，只是加异丙醇，也是很好，哈哈）。
6 5min后 高速离心5min，弃去上清液，这时候在管底应该可以看到少量白色的TRNA.（如果对产量要求不高，这一步最好是7500g\min，可以明显提高纯度。）
7 75％的乙醇500ul洗涤（务必使管底的少量白色物漂起），7500g离心5min，弃去上清液
8 重复7
9 干燥10——15min（不一定非得等乙醇全部挥发），加水10－30ul
10 2ulTRNA溶于300－500ulDEPC-H2O中，测OD比值，2ulTRNA 电泳。
11 TRANA最好不要保存时间过长。我现在是当天用，当天提。
12 手套、口罩、台布开始的时候应该是必须的，等熟练了则可以不要。操作都要在冰上进行。
13 枪和枪头应该是RNA 专用的。
14 所用的东西要用DEPC 水处理。
