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标题:【求助】蛋白确实有磷酸化用质谱做的话该用什么质谱

wwwh[使用道具]
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发表于 2015-10-18 13:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白确实有磷酸化用质谱做的话该用什么质谱

各位大神：
       我想做一下病毒中某一蛋白的磷酸化位点，之前已有人用32P放射显影证明该蛋白确实有磷酸化。请问下，我用质谱做的话该用什么质谱？最重要的是我到底有没有必要纯化该蛋白再去做质谱？如果只是用SDS-PAGE分离一下，可不可以满足质谱磷酸化位点鉴定？感谢大家的帮忙，跪谢。
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发表于 2015-10-18 13:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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SDS-PAGE染色后能确定目标蛋白条带，可以不用纯化蛋白，直接切胶条消化打质谱。
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PP熊[使用道具]
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发表于 2015-10-18 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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那会不会有蛋白信号覆盖的问题？好像有文献这么说
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rrra6[使用道具]
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发表于 2015-10-18 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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所以要看你的目标蛋白的丰度、胶上的位置是否还有很多杂蛋白。
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malong[使用道具]
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发表于 2015-10-18 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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还想问下：打质谱前，蛋白染色的试剂要不要求色谱或质谱级？谢谢
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QQ爱[使用道具]
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发表于 2015-10-18 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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染色时不用。切胶条后用的试剂需要。
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