样品前处理

一个很简单的前处理，从中草药中萃取黄酮类化合物。文献有用70%甲醇或者70%乙醇超声30min、或者回流1.5-4h，将萃取液定容后直接上高效液相。现我的问题是虽然标准曲线已作出，但是对实际样品：1）样品：甲醇=1：20超声30min，合并四次萃取液；2）70%甲醇60℃超声40min；3）80%甲醇在85℃下回流2h。最后过0.22μm的尼龙66膜上机。
以上3种方法都试了，上级还是没有我要的标准峰啊，而且试了几乎文献所有提到的检测波长，调节了进样量，流动相，都没有我要的峰。总黄酮的峰移动会不会太大了？有机新手还在纠结分析问题中，求拍醒！现主要想解决的问题是前处理大家有没有什么好的建议，最好不用水，氮吹不净。还有想问问用含水和不含水的溶剂萃取有什么区别呢？

标准曲线加空白基质了么？回收率做了么？

没有，都没有，肿么办？基质标怎么做？这是一种藏药

不好办啊，亲。根据你的结果很可能这种前处理方法回收率为零。

但是其他的处理方法连峰都没有，怎么办？我是直接拿甲醇水的混合萃取液上机的，我再试试用混合液配标品上机试试

试那个没用。参考一下文献，做回收率。

黄酮类是一大类，你的标准峰只有一个，那么说目标物只有一种。但是分离结果是样品没有，从你叠加的图来看，重现性说的过去，那么有三点需要注意：
1、样品中的含量高低是否达到最低检出限，即灵敏度是否足够。不够的话采取浓缩富集。已富集的话就加大富集倍数。
2、样品中的目标物是否溶于提取液？
3、样品是否稳定？
    先确定这三点，然后再试验试试。祝成功。对，还有一点，可能性很小，但我遇到过，标准品是否对？CAS号，分子量、分子式，确定万无一失。

你说的我都考虑过了，都没有问题，文献提供的流动相大同小异，我偷懒用了这个最简单的。下午水相换做0.4%磷酸，好多峰都随着出来了，但是标准峰重叠了，现在正加大甲醇调节

其实：我觉得这个不是前处理的问题，使他的对照品选对没有的问题，你确定你提取的里面有这个东西？
第二要漂移最大的可能是溶剂效应，加点水就好了，在样品里面
第三，评很好柱子没有

老师说检测黄酮大类都用芦丁，都在这个位置出峰，我表示深深地怀疑。样品里面确定有黄酮大类；我觉得不是漂移；加水后拖尾了；柱子平衡好了。