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标题:【求助】投稿SCI,修回的建议补实验,请高手指点

sunbent[使用道具]
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【求助】投稿SCI,修回的建议补实验,请高手指点


投稿修回的意见是这样的:Since the main purpose of this study was to investigate the effect of XXXXXX on thyrocytes proliferation, additional markers for cell proliferation will be required other than MTT assay, which may represent cytotoxic effects of XXXXXX.文章没有发,不能把干预药物说出来,用XXXXXX代替,请诸位谅解。
我想请教各位,我做的是MTT和CCK-8研究增殖的,因为MTT和CCK-8的趋势完全一致,所以就只写了MTT,除了MTT和CCK-8,还有什么更好的方法做增殖么?
拜托大家帮忙,文章要求11月1号之前修回,急死我了
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bojitu[使用道具]
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BrdU?
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vera+[使用道具]
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BrdU或者3H-thymidine incorporation assay. 前者简单些,就是试剂盒稍贵,后者用到放射性检测,需要特殊实验室。这两个assay才是真正看细胞的proliferation 而不是viability。 你用的MTT或者CCK-8其实看得是细胞的viability,或者就是药物的cytotoxicity.
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QUOTE:
原帖由 vera+ 于 2015-10-19 10:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

BrdU或者3H-thymidine incorporation assay. 前者简单些,就是试剂盒稍贵,后者用到放射性检测,需要特殊实验室。这两个assay才是真正看细胞的proliferation 而不是viability。 你用的MTT或者CCK-8其实看得是细胞的viabil ...

我也一直在找cell proliferation, cell cytotoxicity, cell vialbility 检测方法的异同。
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看来只能做Brdu了,试剂盒比较贵,要5000左右吧,我想做Brdu-ELISA方法的,免疫荧光的不好量化;另外我打算做细胞计数;谢谢楼上的各位
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seagate[使用道具]
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也可以用EdU,不知道你做多少样?
EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。
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ero11[使用道具]
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用MTS或者wst-8,你自己查查有卖吗,你们这里,方便安全的东西啊,呵呵
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除了BrdU以外,还可以通过流式检测细胞增殖,因为MTT和CCK8是很粗略的增殖研究手段,目前似乎SCI已经不承认了,必须进一步实验验证。
除了上述以外,还应该做一些蛋白,比如cyclin和激酶,及一些相关的因子检测,这样会更充分些。
祝,成功。
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ladyhuahua[使用道具]
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CFSE染色,流式检测也可以反映细胞增殖。
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ALALA[使用道具]
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最好流式细胞仪检测,上述有些方法真的已经很古老了
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