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标题:[未解决]【转载】透射电镜生物样品制备失败的关键原因哪几个

  [未解决]本主题悬赏 可用分 1  
tomm[使用道具]
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【转载】透射电镜生物样品制备失败的关键原因哪几个

透射电镜生物样品制备失败的关键原因哪几个
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ayanyang[使用道具]
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1.取材是否准确;2.固定的好坏;3.修快是否准确;4.超薄切片质量。
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ayanyang[使用道具]
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1.取材是否准确;2.固定的好坏;3.修块是否准确;4.超薄切片质量。
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jom[使用道具]
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回复 #1 tomm 的帖子

1.首先取材部位要准确,2.固定浸透时间要合理,3.脱水置换要选合适的脱水剂(系列丙酮,或乙醇),4.修块位置要准确,5.切片厚度要适中(500埃左右)6.染色时间及染色剂要使用的恰当到位,这6条都注意到并实际应用准确,定会出好的结果。
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坚持2011[使用道具]
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多谢!也有此问题,谢了!
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回复 #1 tomm 的帖子

可以说电镜制样的每个步骤都很重要,
1.取材:要求部位准确,块小,时间短,低温,器械锋利,减小机械损伤.
2.固定:戊二醛固定时间可以适当延长,一般不要超过一周,期间要更换一次固定液,且要保持低温固定,充分清洗后再进行锇酸固定1-2小时,时间一定不要太长.
3.脱水:锇酸固定后经过充分清洗,进行酒精梯度脱水,一般50%,70%,80%,95%,无水酒精,
4.样品侵透,包埋.一定要保持干燥,侵透彻底.
5.聚合:由室温到高温梯度升温聚合.如35度,45度,60度顺序.
6.潮波切片:切片机性能,片厚度,捞片,载网质量都需要注意.
7.电子染色:过程中一定要避免一切污染.
这样才有可能得到一幅满意的电镜图像. 很不容易,呵呵!
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small2011[使用道具]
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多谢了,努力学习。。。。。。。
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最近在学习生物制样,学习一下!
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坚持2011[使用道具]
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好难哦!我也要做的,请教一下锇酸溶液的价钱?哪里有卖的?谢谢各位了!
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大学习[使用道具]
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锇酸致癌的,容易挥发,呼吸道吸入致癌.
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