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大鼠源的,参照文献Dietbert Neumann etc. Mammalian AMP-activated protein kinase: functional,heterotrimeric complexes by co-expression of subunits in Escherichia coli.Protein Expression and Purification 30 (2003) 230–237.的确,酵母的、人源的AMPK结构都已经解析出来了。我们目前发现一个小分子激动剂,想做蛋白与化合物结合的结构分析,当然这个是后话,现在先是想表达出一个有活性的蛋白而已。
可能按你说的结果能好些,不过我觉得很奇怪,我的可溶性蛋白浓度总是在0.2-0.3mg/ml,再怎么说浓缩了之后蛋白浓度应该升高了才对啊。我的buffer是:50mM Tris-HCl PH7.5, 1mM beta-巯基乙醇,1mM EDTA