小中大老师,您好!看到您在网站上发的您自己做的平板克隆形成实验,最近我也要做这个实验,想请教您几个关于这个实验的问题。
\> 我看了您拍的平板的照片,请问是普通的平板形成还是做的软琼脂呢?
\> 我的细胞是贴壁细胞 但是贴壁性非常不好,换液的时候都可能使得细胞脱落,细胞密度低的时候尤其容易脱落,像我用的这个细胞是不是用软琼脂克隆形成会比较好呢?
\> 那么在做软琼脂克隆形成实验时,由于我做的是药物的抗性,如果我还需要加药处理细胞的话,这个药物在细胞接种之后是怎么样加呢?请问是直接在配上层软琼脂,培养基和细胞混合液的时候就把药物也混合在里边吗?像配氨苄细菌培养板那样?
\> 另外还有一个问题要请教的就是 用不同孔板做这个实验的时候 一般每个孔都接种多少细胞?(6孔板或24孔板或10cm板),我之前也做了6孔板的接种,但是按正常的消化时间,300个细胞/孔接到6孔板就许多细胞不贴,而剩余细胞高密度时在6孔板中贴得不错,是因为细胞密度低就不容易贴吗?
\> 请老师指教,谢谢!