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标题:【分享帖】tca8113细胞克隆形成实验吉姆萨染色结果

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【分享帖】tca8113细胞克隆形成实验吉姆萨染色结果


tca8113细胞克隆形成实验吉姆萨染色结果


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tca8113细胞克隆形成实验吉姆萨染色结果


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我做的平板克隆实验


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我的平板克隆实验照片


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我的平板克隆实验照片


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我的新鲜平板克隆实验照片


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老师,您好!看到您在网站上发的您自己做的平板克隆形成实验,最近我也要做这个实验,想请教您几个关于这个实验的问题。
\> 我看了您拍的平板的照片,请问是普通的平板形成还是做的软琼脂呢?
\> 我的细胞是贴壁细胞 但是贴壁性非常不好,换液的时候都可能使得细胞脱落,细胞密度低的时候尤其容易脱落,像我用的这个细胞是不是用软琼脂克隆形成会比较好呢?
\> 那么在做软琼脂克隆形成实验时,由于我做的是药物的抗性,如果我还需要加药处理细胞的话,这个药物在细胞接种之后是怎么样加呢?请问是直接在配上层软琼脂,培养基和细胞混合液的时候就把药物也混合在里边吗?像配氨苄细菌培养板那样?
\> 另外还有一个问题要请教的就是 用不同孔板做这个实验的时候 一般每个孔都接种多少细胞?(6孔板或24孔板或10cm板),我之前也做了6孔板的接种,但是按正常的消化时间,300个细胞/孔接到6孔板就许多细胞不贴,而剩余细胞高密度时在6孔板中贴得不错,是因为细胞密度低就不容易贴吗?
\> 请老师指教,谢谢!
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QUOTE:
原帖由 guagua 于 2015-11-14 15:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
老师,您好!看到您在网站上发的您自己做的平板克隆形成实验,最近我也要做这个实验,想请教您几个关于这个实验的问题。
\> 我看了您拍的平板的照片,请问是普通的平板形成还是做的软琼脂呢?
\> 我的细胞是贴壁细胞 但是贴壁性 ...

你好:
1、我做的是平板克隆形成
2、平板克隆形成是适用于贴壁细胞的, 软琼脂克隆适用于悬浮细胞, 贴壁的细胞悬浮起来就不能活了(个人做实验的经验,tca8113是舌鳞癌细胞,贴壁生长,悬浮后即死亡)
3、贴壁细胞接种数量依细胞种类不同,数量可能有些变化,不过一般变化不大,做克隆实验最好用培养皿(直径6cm的),毎孔100,200,300,设计三组每组再设计平行对照,一般都有很好的结果。
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whitesheep[使用道具]
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这么多克隆能数的清吗?
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pore[使用道具]
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图中可知你用的是6孔板吧,上面文字又说6CM皿。是不是你做的啊。
感觉用6孔板或3.5CM皿是最好的。
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