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标题:【求助】怎样应用ALP试剂盒检测ALP活性？

冰儿0109[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】怎样应用ALP试剂盒检测ALP活性？


要检测成骨细胞经药物作用后的ALP活性，应用南京建成的ALP检测试剂盒，但不知道是检测细胞培养液中的ALP还是细胞裂解后的ALP活性?亟待回答！Smile
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dreaming[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

当然是裂解后的。我也正准备做呢！
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冰儿0109[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你准备用什么裂解，超声还是裂解液？
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ero11[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

两种裂解方法都可以,我是用细胞裂解液的,可行!
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冰儿0109[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ero11 于 2015-11-14 15:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

两种裂解方法都可以,我是用细胞裂解液的,可行!

你用的细胞裂解液是如何配的？
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冰儿0109[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有个问题，要是测裂解后的ALP，那就得弃去培养液，其中的ALP也就没法检测了，也就是说这种方法检测的是细胞内的ALP活性，这样做可靠嘛？
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发表于 2015-11-14 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 ero11 于 2015-11-14 15:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

两种裂解方法都可以,我是用细胞裂解液的,可行!

请问，你的裂解液配方如何？
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雪花子[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也买回来了 正发愁不会用呢 你做好了吗 交流一下吧
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冰儿0109[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 雪花子 于 2015-11-14 15:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我也买回来了 正发愁不会用呢 你做好了吗 交流一下吧

我也还没做哪，实验室的比色杯不见了，还要去买，晕死！！
你做了嘛？
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qhyu[使用道具]
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发表于 2015-11-14 15:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

吸去每个孔中的培养液，加入100ul的0.1％Triton X-100，置4℃下12h裂解细胞后反复吹打制成悬液，每孔取50ul转入新的96孔培养板中进行孵育，孵育的具体操作按说明书进行
这是我一个师哥论文上的方法,不妨试试,我也正要测呢,我想问问你每次检测所用的成骨 细胞是第几代的?
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