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相关疾病：
白血病
一些拙见：
一：人的白血病细胞株（悬浮生长）做粘附实验时最好用Fn纤维连接蛋白。
1）理论基础
细胞外基质是构成造血微环境的重要组成部分,而纤连蛋白(Fn) 则是细胞外基质的主要成分之一 。骨髓中造血干/ 祖细胞多发现在富含Fn 的区域。Fn 可将造血细胞和多种造血生长因子固定在局部微环境中,也可为造血细胞提供增殖和分化的信号。利用Fn纤维连接蛋白更接近人体微环境。
2）具体方法
用PBS 配制100μg/ ml Fn ,按100 微升/ 孔加入96 孔培养板。将培养板置4 ℃过夜。用PBS 洗1 次后,再用1 % BSA 在37 ℃封闭2 小时。用RPMI1640 培养基洗2 次后,经包被的细胞培养板用于粘附实验。
二：有没有一定要求人源纤维蛋白？
人源纤维蛋白结果还可以，至于异种纤维蛋白能否成功，有勇气不妨试一试，不过要有足够的银子噢Smile
三：黏附率计算
调整细胞浓度为0. 5 ×106/ ml ,可用细胞生长因子处理30 分钟,按100 微升/ 孔加入Fn 包被的细胞培养板。低速离心培养板2 分钟,使细胞沉降于培养板底部,在CO2 培养箱中静止放置30 分钟,吸弃未粘附的细胞,用PBS 洗2 次,粘附细胞用Promega 公司的Cyto Tox96R Non2Radioactive Cytotoxicity Assay Kit 定量。主要步骤如下:用90 μl PBS 和10 μl 裂解液加入含粘附细胞的培养孔内裂解胞;504 ×g离心培养板10 分钟,取50 μl 加入另一96 孔培养板;加入50μl 底物在37 ℃反应30 分钟,加入终止液终止反应;用酶联仪测定OD490的值;粘附细胞百分比等于粘附细胞OD490和加入总细胞OD490的比
