细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】吸光度值A可以是大于1的吗?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:【求助】吸光度值A可以是大于1的吗?

niangao1980[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107990
精华 0
积分 255
帖子 230
信誉分 100
可用分 1936
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
1
 

【求助】吸光度值A可以是大于1的吗?

我最近作了MTT,随毒性药物的作用,吸光度逐渐降低,我很高兴。
本以为行了,可是,在查文献是却发现,很多文献报的各组吸光度值A都是小于1的,而我的除了空白对照是小于1以外(0.05),其余都是大于1的,在2.7--1.3之间,我的操作没有问题啊,而且重复2遍实验都是这样,波长是570nm。
我的结果怎么样?吸光度是怎么算的?A值从理论上讲,可以大于1么?
顶部
土坷垃[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 107970
精华 0
积分 148
帖子 55
信誉分 100
可用分 986
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
2
 

可以大于1的,供参考。
cuturl('http://www.cbio21.com/ky/meibiaoyi/ascent.htm')
回复:请教:酶活性的测定及标准管的设置问题? - 丁香园论坛
数值在在2.7--1.3之间,可能你的细胞数接种得比较多吧?
太大的话不在线性范围,误差较大。一般线性范围为0.2-0.7的。
顶部
niangao1980[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107990
精华 0
积分 255
帖子 230
信誉分 100
可用分 1936
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
3
 

那我的结果还可以写文章么?会不会叫人笑话?
顶部
standup[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107982
精华 1
积分 231
帖子 137
信誉分 102
可用分 1481
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
4
 
是不是细胞量接种多了,重新做一次麻烦吗?
顶部
bling[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77268
精华 0
积分 383
帖子 486
信誉分 100
可用分 3216
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
5
 

我也有问题要问,我是以每孔10000个细胞接种的,实验结果出来后,吸光度值都在0.02~0.07之间,可是很多文献都每孔4000个细胞接种,吸光度值却都接近1,我重复了n遍,吸光度值从没超过0.1,这是怎么回事?
顶部
ladyhuahua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76658
精华 0
积分 984
帖子 1667
信誉分 100
可用分 9116
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-8
状态 离线
6
 

不同种类的细胞表达的琥珀酸脱氢酶是不同的,并且增殖速度是不一样的,你的细胞可能增殖比较慢,实验这几天没有怎么长,所以应该把细胞密度再传高一些,是原代细胞吧?一般来书增殖都很慢的,所以你估计得提高一倍左右的细胞。不能完全按照书本操作的!
顶部
bling[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77268
精华 0
积分 383
帖子 486
信誉分 100
可用分 3216
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
7
 

我养的是肿瘤细胞,是买的细胞株,我在进行药物干预时根据文献上的方法先用无血清进行同步化,然后加药,配药时仍用无血清培养基,是不是跟细胞在无血清环境中不能增殖有关,96孔板可获细胞数大概是10的5次方,考虑到我的细胞在实验过程中只会凋亡,基本不增殖,我可不可以,以10的5次方个细胞进行接种,因为我已经接种到10000个了,吸光度值还这么低,我若继续以10000个接种,测出的吸光度值这么低有意义吗?能否用这个作为最后的实验结果?
顶部
bling[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77268
精华 0
积分 383
帖子 486
信誉分 100
可用分 3216
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
8
 
还有有是吸光度测出来是负值这又是怎么回事,请赐教,谢谢!
顶部
bling[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77268
精华 0
积分 383
帖子 486
信誉分 100
可用分 3216
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
9
 
我养的是肿瘤细胞,是买的细胞株,我在进行药物干预时根据文献上的方法先用无血清进行同步化,然后加药,配药时仍用无血清培养基,是不是跟细胞在无血清环境中不能增殖有关,96孔板可获细胞数大概是10的5次方,考虑到我的细胞在实验过程中只会凋亡,基本不增殖,我可不可以,以10的5次方个细胞进行接种,因为我已经接种到10000个了,吸光度值还这么低,我若继续以10000个接种,测出的吸光度值这么低有意义吗?能否用这个作为最后的实验结果?

===============================================================================================================

“96孔板可获细胞数大概是10的5次方”,那是针对Hela细胞而言,咱们一般的细胞的大小比Hela细胞大,所以估计减半吧。大概是5X10的四次方左右吧。
考虑你的肿瘤细胞不增殖,你可以接种10000-50000之间的细胞数。另外,不知道你最后做MTT孵育的时候是否用含血清的培养基,理论上孵育时的应该用含有2-8%左右血清的培养液孵育,有利于细胞吞噬MTT并将其转化(有文献专门报道过,具体原理记不清楚了)。
至于你最后得出负值,是不是你的本底孔没有做好,或者不干净?你再查查原因吧。
顶部
zzzz[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74598
精华 1
积分 656
帖子 967
信誉分 102
可用分 5638
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
10
 
那我在进行药物干预时应该用无血清培养基还是含血清培养基
顶部