小中大【讨论帖】在细胞传代吹打中如何能够做到少泡沫...
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各位做细胞培养的前辈后辈们，在细胞传代过程中，吹打是很关键的一步啊。能不能有效地快速把贴壁细胞吹打下来，关系到细胞后续的生长和实验啊。当吹打时产生很多泡沫的时候，很难再显微镜下观察清楚有没有完全吧细胞吹打下来。
所以，希望大家都来交流一下各自的秘诀吧。如何能避免少起泡沫呢。
本人在试验中有些体会，写出来与大家共勉：
1.有一些细胞可以不用消化液就能够吹打下来。个人认为能不用消化液是最好的。譬如巨噬细胞。我一直维持巨噬细胞，每次传代都不用消化液，吹打的时候我一般会用瓶内未换的剩余旧培养液，这样子比着用新的培养基可以减少点泡沫的生成。当然这个一定要求原培养基未被污染。
2.吹打的时候我们都知道要一点挨着一点吹，这样子不会漏掉地方。而我每次都会首先沿着两条对角线的方向吹打，然后再按照横着或者是竖着吹打。这样子就可以比较容易把细胞吹下来，因为首先细胞的各个方向都受力了，而且比较均匀，细胞比较容易下来，而且对细胞形态的维护比较好。
3.对胶头滴管的要求。
胶头滴管头部最好是做成弯曲45度角的形状，一般都是自己用止血钳夹住头部在酒精灯上烧弯。我还发现，如果你吹打的时候，滴管的头部边缘如果是和吹打平面平行的话，反而容易产生泡沫，贴在底部吹，也容易产生泡沫，最好是能够有一个角度顺着你吹打的方向和滴管一致。并且稍微远离吹打面，这样滴管内的液体容易流出，阻力会减小，就不会产生那么多的泡沫了。
4.控制你吹打的节奏，急速地吹打会很快地产生泡沫，用力越大，越容易产生。最好是能够把握住自己的力度和节奏，有条不紊的吹打。我的体会是以自己拿滴管用手的轻松程度为准，如果刚吹几下很快就累的话，那就证明是节奏过快。吹完都不累的话那就是太慢力度也不够。我觉得一般在吹完一遍时指头发困会比较好。这样的节奏能够比较快速而且有效地完成。
暂时总结这么多，欢迎大家都来讨论啊！
