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标题:【求助】要进行质谱检测，需要的上样量一般是多少？

跳跳哈里[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】要进行质谱检测，需要的上样量一般是多少？

从来没做过这个，老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了。想问一下有经验的朋友：
1） 要进行质谱检测，需要的上样量一般是多少？
2） 胶有什么特殊要求没？
3） 胶切下来之后要怎么保存？可以保存多久？
还有米有其他需要注意的事项可以提醒一下……:rol:
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yuanyuan[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

配胶和切胶避免角蛋白污染，配胶试剂专用；
切胶样品-80℃保存，不同仪器可能要求不同；
如果考染能看到带就可以做质谱，银染出的带不一定够做质谱。
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蓝色雨梦[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

恩谢谢。想再问一下放在-80保存的话……就是裸胶放进去= =？还是要在什么buffer里？用塑料袋封上……之类的？
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yayayu[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

请问，“老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了”   --切的 是 电泳胶，   还是 直接切的 WB显色的膜呢？  谢谢
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xiaoxiaojinglin[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 添加 xiaoxiaojinglin 为MSN好友 通过MSN和 xiaoxiaojinglin 交谈

 小中大

【回复】

电泳胶，不要转膜。之后的处理应该是切胶，然后把胶融掉以提出蛋白= =？？所以蛋白含量太少就白瞎了……
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发表于 2015-11-27 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

质谱鉴定蛋白质需要多少量啊？一般是指的浓度还是质量啊
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发表于 2015-11-27 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

质量，当初具体是咨询一个公司的销售人员
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yazi[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

如果是LC-MS的话不是液体的状态的吗？这个用质量怎么计算啊
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灵魂[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

液体按浓度换算啊
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p1900[使用道具]
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发表于 2015-11-27 13:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

大概一种蛋白需要100-200 ng
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