小中大【求助】HK-2细胞状态非常不好
各位高手好，我在养人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）中碰到一些问题，想向各位请教一下。我是从协和细胞库购买的细胞，他们给我的时候已经是P13了。
我先用世纪星的胎牛血清与DMEM/F12来配培养基，比例是90％DMEM/F12+10%世纪星FBS+1%的双抗，然后去养细胞，但是细胞状态非常不好。过不了一天培养基就变的非常黄，需要重新换液，但是细胞却没有长多少。另一方面也是最为严重的现象是，上皮细胞长得跟树杈一样的，感觉存在非常严重的成纤维细胞转分化！正常的HK-2细胞应该是成铺路石样的形态，但是这个细胞拿到我手里之后就基本上没有出现这样的情况！！真是非常郁闷，后来我把细胞培养的图片也给协和那边的老师发过去了，她们说是我的血清不好，这个细胞需要用非常好的血清，所以我就换了血清。
后来买的是Clark公司的特级胎牛血清，100ml都要475元的那种！Clark这个牌子虽然没有Gibico的牌子硬，但好歹也是澳大利亚进口的啊，这个血清应该是非常好的。我昨天晚上重新配了新的培养基，90％DMEM/F12（Gibico的干粉，杭州吉诺自己配制的，里面有谷酰、HEPLES、NaHCO3）＋10％FBS（Clark）＋2％双抗（配制的时候拿错了吸管。把2ml的吸管当成1ml的吸管用了，所以最后本来应该加1ml双抗的培养基我加成了2ml，使抗生素的终浓度变成了penicillin 200 units/ml + streptomycin 200 ug/ml），血清如上用的是Clark这个牌子的。配完之后觉得培养基比较的黄，所以用试纸测了一下，PH是6.8，当时已经比较晚了，而且觉得细胞耐酸不耐碱，培养液酸一点应该不要紧，所以就没有调PH值，而是直接用这个培养基给原来的细胞换了液。原以为换了血清细胞会长的非常好，哪知道今天早上去看的时候细胞虽然说转分化现象有一定的轻微改善，但是细胞中却有更多的空泡和黑色小点，细胞的代谢状态非常很不好！原因应该就是我的培养基有问题，但是我又不知道是哪个地方出了问题，所以非常希望各位旁观者清帮我来好好分析一下！！
附件中的图片是我昨天晚上换液之后今天上午看到的细胞状态！
