小中大关于RNA溶液的纯度和浓度问题
关于RNA溶液的纯度和浓度问题 [转载]
把结果总结了一下，请大家分析分析
前天把冻存的RNA溶液拿出来又测纯度和浓度，结果如下
药物组
OD260 0.460 （前天刚提出来测为0。360）
OD280 0.259 （ 前天刚提出来测为0。208）
比值为 1.76 （比值为1。73）
浓度为 9。2 UG/UL （浓度为7。24 UG/UL）
什么原因造成这一组浓度差距这么大？看到有的战友说，试剂盒提RNA的量可在OD260的值在0。15－－0。5，但没有提到稀释倍数，如果按稀释500倍的话，RNA溶液浓度可在3－10微克之间，我这个值还算正常。试剂盒提RNA测OD值时，稀释的倍数是不是500倍呢？
另外，两次测的值的差距有2UG/UL之多，我都是用同一批DEPC水调的零，单纯是机器误差，会差这么多吗？我应该以哪一次的测量值为标准进行定量开始逆转录呢 ? 有的战友说比值大于2，说明RNA降解了成单核苷酸了，但是我的可能也不属于这种情况吧？
阳性对照
OD260 0.239 （前天刚提出来测为0。229）)
OD280 0.139 （ 前天刚提出来测为0。130）)
比值 为 1。72 (比值为1。76)
浓度 为 4。7 UG/UL （浓度为4.58 UG/UL）
这一组好象还好，变化不大。
昨天用以上两组的RNA液（各加了1UL进行RT）逆转录后做了B-ACTIN的PCR，做了一个25UL体系，（两组上样量均为1UL,岂不是加的模板量不一样多？）做了一个50UL体系，（两组上样量均为2UL），做了一管PCR产物再PCR（因为上次B-ACTIN的PCR产物没有条带出现）
结果25UL体系B-ACTIN都跑出来了，亮度差不多；也没有杂带
50UL体系B-ACTIN也跑出来了，亮度比25UL亮很多，且出现两条非特异条带；
PCR产物再PCRB-ACTIN也跑出来了，亮度和25ul体系的一致，但是有一条杂带出现。
今天，又用以上两组的RNA液（各加了1UL进行RT）逆转录后做目的基因的PCR,
其它参数都没有变，只有退火温度变了，但是都没有特异条带出现。
