液相色谱 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】如何装柱—云浆装柱法

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 15  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】如何装柱—云浆装柱法

阿福[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 69991
精华 0
积分 269
帖子 277
信誉分 100
可用分 2146
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-3
状态 离线
1

发表于 2015-12-22 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】如何装柱—云浆装柱法

高效液相色谱柱填充的好坏受到装柱泵和填充方法两方面的影响。就装柱泵来讲，北京创新通恒科技有限公司自行开发的装柱泵经多家客户使用后验证，具有使用方便，压力稳定，安全可靠等几大优势。
对于填充方法，可以从以下五大方面考虑：
第一， 填料的称重。填料一般过量25%左右，太少容易装填不满，导致填充失败；太多压降太大填充不实，导致柱效下降
第二， 匀浆溶剂的选择。选择合适的匀浆溶剂，对匀浆法装柱是非常重要的一步。例如出现肩峰，前脱尾，后拖尾，胖峰等都与匀浆溶剂的选择有密切关系。因为在装柱过程中，填料间的相互作用对色谱床层结构的形成影响很大，而这些相互作用又主要取决于匀浆溶剂的性质。匀浆溶剂的选择应从密度，粘度，极性三个方面来考虑。因为在固液系统中，存在因重力而引起的沉降现象，且粒子的沉降速度V为：
V（cm./s）=2gd2(ρ-ρo)/.3600?
据此，匀浆填装可以依据阻止沉降的思路分成三种：一是设法寻找与填料密度相近的溶液；二是增加液体粘度以阻止粒子的下沉，但粘度太大所要求的填充压力高，在实际中并不常用；三是尽快的在发生较显著的沉降之前完成装柱操作。
另外，为了使粒子在匀浆溶液中更好的分散，从胶体化学的观点来看，溶剂有絮凝剂和抗絮凝剂两类。絮凝剂对填料湿润性差，填料分散在絮凝溶剂中时，颗粒间吸引力大于排斥力，颗粒自动附聚成团，形成大颗粒，沉降速度快，形成疏松的沉降层；而抗絮凝剂对填料湿润能力强，颗粒分散其中，颗粒间的排斥力大于吸引力，颗粒可很好的分散，沉降速度慢，可形成致密的沉降层。因此需选择分散性强的抗絮凝溶剂。与相似相溶原理相似，对于填充正相柱，一般选择醇类等极性溶剂作为匀浆液，如硅胶柱；而对于反相柱，则一般选择烷烃等非极性溶剂作为匀浆液，如C18柱。
注意：匀浆溶液应进行超声2~3分钟，使填料更好的分散和使匀浆溶液充分脱气。
第三， 压力和时间。以填料不碎，装柱泵能承受的压力极限为前提，一般来说，填充分析柱液压为600-700公斤；填充半制备柱液压为300-400公斤。时间以流出液体积为匀浆液的3~5倍为宜
第四， 降压过程。应缓慢而均匀的降压，一般控制在15~30分钟，如果降压太快，则柱子内部的残余压力没能及时平衡而产生较大的压差，会将柱头上的填料挤出柱外，导致柱效下降
第五， 静置10~15分钟，做好标记，保证使用时的液流方向和填充时的液流方向保持一致。
顶部
ero11[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75131
精华 0
积分 684
帖子 1028
信誉分 100
可用分 5953
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
2

发表于 2015-12-22 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我认为真正的装柱方法是不会在论坛里出现的，而且极少申请专利，因为一申请专利大家都会了哈哈。。。不过谢谢楼主敢为天下先
顶部
zhy平平[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114517
精华 0
积分 291
帖子 282
信誉分 100
可用分 2163
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
3

发表于 2015-12-22 16:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢楼主！但是装柱是一门技术加艺术的活儿。比如两个人，即便是受同样的教育，用同样的硬件，用似乎相同的方法和条件，装出来的柱子很可能却是不一样的。所以在文字之外有很多操作方面的讲究，很难面面俱到。几乎每个专业装柱的人，尽管看过不少参考书，都走过相当的摸索之路，最终才确定最适合自己的装柱方法。但是，对于已经走过这个过程的色谱工作者来说，楼主的信息是个很好的总结，对进一步的尝试很有指导意义。
顶部
chenshuanhe[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107984
精华 0
积分 204
帖子 148
信誉分 100
可用分 1493
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
4

发表于 2015-12-22 16:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

"对于填充正相柱，一般选择醇类等极性溶剂作为匀浆液，如硅胶柱'
不对吧？
顶部
阿福[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 69991
精华 0
积分 269
帖子 277
信誉分 100
可用分 2146
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-3
状态 离线
5

发表于 2015-12-22 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以用异丙醇等。
顶部
zhy平平[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114517
精华 0
积分 291
帖子 282
信誉分 100
可用分 2163
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
6

发表于 2015-12-22 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主，实际用非极性溶剂匀浆的也不在少数啊。有什么利弊？
顶部
SO2[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 118006
精华 0
积分 355
帖子 369
信誉分 100
可用分 2696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-9
状态 离线
7

发表于 2015-12-22 16:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢楼主。借人气给大家提供一条信息：新加坡海德利森专业制作色谱装柱机，采用高压气动增压原理，放大比为1：200，驱动气体压力为1.0MPa, 最高压力100Mpa, 是湿法填充高效液相色谱柱的专用设备。系统具有压力高，升压快，回压小，便携式，结构简单，便于色谱柱的装填和拆卸，维修使用方便，外型美观等特点。填充床高度：可变化、范围100mm-500mm（其他规格需定制）。
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
8

发表于 2015-12-22 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我一般是用异丙醇的，分享楼主的宝贵经验了。图片点击可在新窗口打开查看
顶部
vivian4123[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75243
精华 0
积分 417
帖子 494
信誉分 100
可用分 3331
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
9

发表于 2015-12-22 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那装离子柱啥的我都用水呀！
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
10

发表于 2015-12-22 16:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我赞成反向柱子用异丙醇，我长期装填都用的这个。
顶部
 15  1/2 12››