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标题:[求助]加样孔为什么有时出现亮带？

nut6694[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]加样孔为什么有时出现亮带？

[求助]加样孔为什么有时出现亮带？


请问：我在做提取RNA时，在电泳时，所要的条带都有，但加样孔里有时出现亮带，书上说是可能DNA或苯酚的污染，但我不太清楚究竟是哪个步骤出现这样的结果？谢 ！
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911[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得可能是在抽提RNA时TRIZol的量少了一点，造成DNA的污染
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丁香@@[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
第一次离心后在脂质层和上清之间含DNA，如果上清液吸的太干净可能会吸入一部分的DNA。而DNA片断很大，无法通过琼脂糖的空隙，所以滞留于加样孔内，显示为亮带。建议你上清液不要吸的太干净！
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喵咪[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上的说的对！加样孔有亮带一般就是基因组DNA，也就是DNA污染
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babybabe[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也有时出现这样的情况，看来以后提取RNA要小心了。  
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babybabe[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
关键是取上清时不能够太贪心。
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韩梅梅[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也遇到过同样问题，

取上清时小心一点就好了.
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=菓子=[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那PCR加样的时候，出现相同的问题是不是也是DNA污染呢  
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不懂[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般情况下，也是有DNA。DNA在琼脂糖凝胶中是跑不动的，所以停留在加样孔里！
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nut6694[使用道具]
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发表于 2011-10-5 17:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
但是RNA电泳时如果加样孔很亮，而该有的条带却很不明显的话，是什么问题呢？请大家多多指教
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