小中大不知道你自己有没有分析过原因。你这种情况我的一个同学也遇到过，我想你可以从一下几方面分析：
1. RNA提取的问题。在测定时可以用Tris缓冲液去测，那样会更准确些，另外，还是要重新提RNA，这是最关键的步骤。如果总不满意，可以试试其他方法。以我的经验RNA用水测，能达到1.6-1.7，有时也可以做反转录，但要注意你的260/230比值是否大于2。
2. 确定RNA没有问题后再确定你的反转录没有问题，根据你的RNA的量去大概判断模板cDNA的量。
3. 看看你的Taq有没有问题，换一种Taq酶试一试。
顺便说一句：你做实验不要太着急，先确定最初一步没有问题再继续，这样往往不会耽误实验，虽然你前面步骤可能花费时间多一些，但是总比每一步都不确定，到最后既浪费钱，又浪费时间还找不到原因好。
