生物质谱 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗

p1900[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 129716
精华 0
积分 3273
帖子 1925
信誉分 100
可用分 11045
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-12-17
状态 离线
1

发表于 2016-1-14 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】原生质体瞬时表达后能提取蛋白质吗

如题，能够做到吗？提取的蛋白质量够吗？
顶部
今生如此[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 128421
精华 1
积分 2817
帖子 1550
信誉分 102
可用分 9358
专家分 10
阅读权限 255
注册 2014-11-1
状态 离线
2

发表于 2016-1-14 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

可以，没问题的，做Western都可以。
顶部
钻石[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 133666
精华 1
积分 2357
帖子 1329
信誉分 102
可用分 8246
专家分 10
阅读权限 255
注册 2015-2-5
状态 离线
3

发表于 2016-1-14 16:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

是这样的 我将我的目的基因和GFP标签连接在一起原生质体共表达后，想得到与标签连接的目的蛋白的互作蛋白，请问，这样可以做到吗？要做质谱，提取的蛋白量够吗？
顶部
冰激凌[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 128430
精华 0
积分 2798
帖子 1535
信誉分 100
可用分 9020
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-11-2
状态 离线
4

发表于 2016-1-14 16:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

做Western其实也要看你蛋白的表达量，有些容易杂到，有的蛋白也很难杂到，具体情况具体分析，质谱没做过，不敢妄下结论。
顶部
PP熊[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 128277
精华 1
积分 3330
帖子 1976
信誉分 102
可用分 11412
专家分 10
阅读权限 255
注册 2014-10-28
状态 离线
5

发表于 2016-1-14 16:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

您好，我想问一下，如果目的基因是定位在细胞膜上，做原生质体的时候是不是需要marker基因？谢谢
顶部
dadaai[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 130698
精华 0
积分 2001
帖子 1042
信誉分 100
可用分 6336
专家分 0
阅读权限 255
注册 2015-1-5
状态 离线
6

发表于 2016-1-14 16:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

那要看你是要干什么呢？
顶部
妮子@[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 128300
精华 0
积分 2457
帖子 1334
信誉分 100
可用分 8201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-10-29
状态 离线
7

发表于 2016-1-14 16:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

可以干什么呢？我不是很理解，我预测出来的目的基因定位在膜上，我想用实验验证一下，我的基因到底是定位在哪里的。谢谢您
顶部
n111[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 129714
精华 0
积分 2860
帖子 1620
信誉分 100
可用分 9726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-12-17
状态 离线
8

发表于 2016-1-14 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

那就把你的目的基因和荧光标签连起来，做个定位就好了吧
顶部
灵魂[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 131724
精华 0
积分 1538
帖子 756
信誉分 100
可用分 5071
专家分 0
阅读权限 255
注册 2015-2-4
状态 离线
9

发表于 2016-1-14 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

瞬时表达后提取蛋白的提取液用提取叶片的提取液可以吗？
顶部
钻石[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 133666
精华 1
积分 2357
帖子 1329
信誉分 102
可用分 8246
专家分 10
阅读权限 255
注册 2015-2-5
状态 离线
10

发表于 2016-1-14 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

嗯  谢谢  我是做了  可是测不出蛋白总量  愁
顶部