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标题:【求助】HPLC 和 质谱, 从质谱上看分子量

qinqinai[使用道具]
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【求助】HPLC 和 质谱, 从质谱上看分子量

如题.  为什么不提供核磁数据,就能确定氨基酸序列的正确吗
前后委托不同公司合成了一个20 aa 的 多肽,都只提供HPLC 和 质谱, 从质谱上看分子量都是对的   但是两个多肽的 核磁氢谱却有不同,不知道是什么原因?
请教各位大侠,是不是某个公司合成的多肽有问题,还是说从氢谱上不能直接对比?谢谢
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大嘴猴[使用道具]
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【回复】

是的,现在多肽合成公司都是只提供HPLC和质谱报告的,这是现在合成多肽行业中的标准报告,核磁这一块基本很难保证。现在合成多肽技术主要是化学合成,会用到一些有机溶剂,合成期间肯定会会有一些盐分生成,而且每一批次的盐分生成量是比较难控制成一样的的,而多肽中的盐分是影响多肽氢谱结果的一个非常重要的因素,两次合成的多肽氢谱结果出现差异是有可能的。
      至于结构,多肽化学合成,都是从C端到N端一个一个接的,序列一般都是能保证正确的,所以纯度,质谱是保证定制多肽行业中最重要的检测标准的。
       个人建议,希望对你有所帮助。
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3
 

【回复】

99%多肽一般MS对了,他这个产品也对了!因为合成过程是根据肯定序列一个一个接的!当然!这个是纯信用的!只会有极其个别的会出现多肽造假!如果要知道序列,那就测序!
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跳跳哈里[使用道具]
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【回复】

你序列是否含有特殊的氨基酸,比如D型氨基酸,D型相比L型贵。
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wawa11[使用道具]
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【回复】

其中有一个 D型 氨基酸,  但是怎么检测这个氨基酸是D型还是L型呢
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冰激凌[使用道具]
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【回复】

楼主,质谱相同不能说明问题,比如Ile 和Leu的分子量是一样,你根本分不清谁是谁。
20肽用氢谱去表征,要解析起来难度不小啊,C13NMR应该更好一些吧!还有个直接的方法就是把两个样品1:1混合后走HPLC,看看是不是可以重合。如果完全能重合,基本就可以定下来。
当然楼上说的序列分析绝对是好方法,但是似乎没有必要花大价钱去做。
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大嘴猴[使用道具]
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【回复】

没有这两个氨基酸。
碳更难把,浓度要求大,溶解度有限制。
HPLC 这个办法好像不错。 那你也觉得核磁不同也可能是同一条多肽?
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8
 

【回复】

个人认为碳谱会更好一些,就是要用的多肽量会要多好几倍,楼主可能会心疼。
我们没有看到你的氢谱,也不知道两个东西打出来的核磁是不是完全不一样,还是混样进一针实惠方便。
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wawa11[使用道具]
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【回复】

两个氢谱其实差异只在3.5-4.0 ppm处, 有一个多了两组峰,并且强度挺大
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今生如此[使用道具]
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【回复】

D型氨基酸贵很多啊,   估计有家公司 用L-型氨基酸代替D型的氨基酸了。
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