【求助】小分子与蛋白光谱是否应该扣除？

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标题:【求助】小分子与蛋白光谱是否应该扣除？

妮子@[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

小弟最近在做双酚A （BPA）和一个蛋白的相互作用，用圆二色谱法。有几个问题想请教一下。
1、看分子式，双酚A应该是没有手性的分子吧，可为什么我单扫双酚A溶液却能在200-220 nm扫出峰来？溶液是PBS+0.1%乙醇，双酚A浓度为1 mM。
2、即然双酚A能扫出峰来，那么蛋白+双酚A扫出来的图是不是应该把双酚A的峰扣掉啊？如果需要扣的话，怎么扣，数值相减吗？
图中红线为纯双酚A的谱，黑线为蛋白+BPA的谱（均已扣除背景）。
谢谢各位了。

附件

2016-1-20 14:29

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灵魂[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

双酚A是有荧光的，应该有两个以上的吸收峰。如果做分子间相互作用，扣除本底是有必要的

大花猫bb[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

Wyy老师：您好！谢谢您的回复。我刚刚开始做光谱，一窍不通。据我所知，圆二色其实测的还是光吸收，只不过是分别测算不对称分子对左旋和右旋圆偏振光的吸收。和荧光还是不太一样吧？我推测BPA应该测不出圆二色谱才对。这是一个左右对称的分子，对左旋和右旋吸收应该是一样是。是吧？

xiaoxiaojinglin[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

谢谢Wyy老师：可我觉得BPA应该测不出圆二色谱才对啊，BPA是左右对称的分子，对左旋和右旋偏振光的吸收应该是一样的。我刚刚开始做光谱，一窍不通，希望得到指教，谢谢！

妮子@[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

圆儿不太懂，好像是测光学异构的。起初我理解成紫外吸收峰，这会仔细看了看才发现你表达的不是那个意思。实在抱歉

无怨无悔[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

首先，我之前做CD的时候也遇到这种情况，本来小分子应该没有吸收，但是的确CD上面显示的是有光谱的，这个时候就必须把小分子的光谱从总的光谱中除去。第二，从你的蛋白质和小分子的图来看，你蛋白质的二级结构已经被破坏，在图中呈现的带有锯齿状的图形，理论上CD做出来的天然蛋白质图，是光滑的曲线。

mimima[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

谢谢qlw4567老师：从光谱中扣除小分子，是各波长数的CD值直接相减吗？谢谢！

p1900[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

理论上是的，CD软件中，里面有个直接扣除的选项，就是和平滑、扣除背景在一起的那里。

n111[使用道具]
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发表于 2016-1-20 14:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

【回复】

没事，不需要什么金币，有什么关于CD的问题可以随时问我，只要我看到就会回复的。