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标题:【求助】求助鉴定问题

jude[使用道具]
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【求助】求助鉴定问题

用MRS培养基分离纯化短乳杆菌,长出好多菌,三区划线后怎样判断哪个是乳酸菌,每样菌都显微镜镜检了,有好几种都是紫色杆状的,怎么判断哪个是乳酸菌,还有就是可以用过氧化氢判断吗?怎么判断?谢谢!!!
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cocacola[使用道具]
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MRS加1%的CaCO3,灭菌,利用混菌法倒平板,35-37℃培养,乳酸菌会在平板下层生长并产生乳酸而形成透明的溶钙圈,见图


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2016-2-16 15:19
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txwuyan[使用道具]
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提取DNA测序鉴定是比较靠谱的方法吧
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wiwi[使用道具]
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我之前也做过,初步判断是否是乳酸菌属,革兰氏阳性菌和过氧化氢酶阴性就可以初步判断是乳酸菌属。我就是这么做的。后面又用16SrRNA鉴定了。证实确实是的。
如果你要鉴定到种,做生理生化实验很麻烦,各种发酵实验的。。。
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jude[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 wiwi 于 2016-2-16 15:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我之前也做过,初步判断是否是乳酸菌属,革兰氏阳性菌和过氧化氢酶阴性就可以初步判断是乳酸菌属。我就是这么做的。后面又用16SrRNA鉴定了。证实确实是的。
如果你要鉴定到种,做生理生化实验很麻烦,各种发酵实验的。。。
...

过氧化氢酶阴性就是指乳酸菌与过氧化氢反应有气泡吗?对过氧化氢的浓度有没有要求,其他的菌与过氧化氢有没有反应,会不会也有气泡,干扰实验结果?谢谢!!
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wiwi[使用道具]
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原帖由 jude 于 2016-2-16 15:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

过氧化氢酶阴性就是指乳酸菌与过氧化氢反应有气泡吗?对过氧化氢的浓度有没有要求,其他的菌与过氧化氢有没有反应,会不会也有气泡,干扰实验结果?谢谢!! ...

3%过氧化氢,有些菌是阳性的,会有起泡。但是乳酸菌是没有起泡的,它是阴性。做这个试验前都得得到单菌落,纯细菌,只要操作得当,不会受到影响的
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moonlight[使用道具]
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MRS培养基是分离乳酸菌的,鉴定一般有糖发酵实验啊,过氧化氢酶实验,甲基红实验,V-P实验,柠檬酸盐实验,等等,你可以查一下,乳酸菌的生理生化特性。或者直接PCR,也就是测16SrRNA
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8黑眼圈8[使用道具]
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可以加点碳酸钙不,有溶钙圈出现的可能是了
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jude[使用道具]
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原帖由 8黑眼圈8 于 2016-2-16 15:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
可以加点碳酸钙不,有溶钙圈出现的可能是了

之前做过碳酸钙的培养基,但是碳酸钙总是沉底,到平板的时候也摇匀了,怎样才能不沉底啊??
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8黑眼圈8[使用道具]
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原帖由 jude 于 2016-2-16 15:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

之前做过碳酸钙的培养基,但是碳酸钙总是沉底,到平板的时候也摇匀了,怎样才能不沉底啊??

加的量不要太多,分开灭菌,倒平板时混合好,一个一个倒好混好到凝固。其实有钱的话买一次性的方便好用.
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