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标题:【求助】2015版药典菌种传代

龙小好汉[使用道具]
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【求助】2015版药典菌种传代

哪位大哥大姐做过菌种传代呀??可不可以教教我!急!!!
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summerxx[使用道具]
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具体操作网上有详细的说明。
需要注意的是,你的冻干管,根据15版药典,应该购自CMCC,传代之后,保藏菌株,一定要搞清楚菌株的传代次数,这个,要求比较严格的,工作种子批不得超过5代。
1、火焰灼烧冻干管,滴加无菌水使玻璃裂开,开启冻干管。
2、加入无菌水/无菌生理盐水/培养基,将冻干粉重悬。
3、取一定量的菌液涂平板,其余的全部接种到含液体培养基的摇瓶中;(两种方法,确保菌株能长出来)
4、保藏菌株,可以保藏摇瓶中的,如果摇瓶中的长的很慢(很有可能会很慢),那就在平板上挑菌体接到摇瓶中,再保种(注意,此时已经是第二代的菌株了。)
如果担心自己搞砸了,那就在保证无菌的条件下,直接接种环挑取冻干菌种,接种到斜面或摇瓶中,冻干管中剩下的菌体妥善保管,以防你接种的操作出现问题。当来,按照药典规定,你的冻干管一旦开启了,就不能在用了。
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你的传代目的?
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龙小好汉[使用道具]
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做药品检验的方法学。
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原帖由 龙小好汉 于 2016-2-16 16:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
做药品检验的方法学。

取培养的菌液按一定比例接种到新鲜的培养基就可以了啊!
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龙小好汉[使用道具]
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原帖由 SO2 于 2016-2-16 16:26 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

取培养的菌液按一定比例接种到新鲜的培养基就可以了啊!

我想要操作步骤 因为是第一次做 也没有人教……
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原帖由 龙小好汉 于 2016-2-16 16:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我想要操作步骤 因为是第一次做 也没有人教……

你现在的菌种是液体菌液?还是固体平板菌种?如果是保种菌液,你取保种菌,先接个100ul到液体培养基试管中(试管约4ml培养基就够了)培养,等到菌长到对数期后期,再按1:50~100的比例接种到新鲜培养基。如取1~2ml培养菌液接种到新鲜的100ml培养基中培养就可以了!
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龙小好汉[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 SO2 于 2016-2-16 16:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

你现在的菌种是液体菌液?还是固体平板菌种?如果是保种菌液,你取保种菌,先接个100ul到液体培养基试管中(试管约4ml培养基就够了)培养,等到菌长到对数期后期,再按1:50~100的比例接种到新鲜培养基。如取1~2ml培养菌液接种到新 ...

我买的是冻干粉。能不能给我个具体的操作步骤呢?
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shenkunjie[使用道具]
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我买的是冻干粉。能不能给我个具体的操作步骤呢?
...

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冻干粉取一点根据菌种量用无菌的生理盐水溶解;
然后在固体平板上涂布,倒置平板在培养箱培养;
待平板有克隆长出,挑单克隆到液体培养基中培养,可以现在试管里,4、5ml的培养基就可了;
待菌液培养到对数期后期,你在取菌液接到摇瓶培养就可了!
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什么菌?
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