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标题:【求助】大肠杆菌发酵

嗅嗅[使用道具]
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1
 

【求助】大肠杆菌发酵

请教各位大神,大肠杆菌发酵。
一、诱导后一两个小时出现溶菌,这是怎么回事,该如何解决啊?
二、看到很多人说发酵OD做到七八十,更有一百多的,我的才30-40!!!  这个注意是培养基的问题,还是什么问题?
三、诱导一个小时以后,OD就不再长了,这又是什么原因呢?

新人求指导,望各位大神不吝赐教!
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NBA[使用道具]
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2
 
1.诱导1、2个小时溶解,各种可能都有,比如,其代谢产物对自身细胞有破坏作用,产生溶菌酶,发酵条件不合适等,
2.大肠发酵0D做到100多很正常也很普遍,培养基及补料是实现高密度发酵的主要因素,这个慢慢摸索吧,主要补料。补料速度,补料配方等。
3.诱导一小时后不长,大多是培养条件没控制好,比如非产物(垃圾)产生的太多一直菌的生长,比如葡萄糖浓度太高,产生葡萄糖效应等。

多看文献的同时在学学基本的理论,代谢过程,慢慢摸索吧,另外摇瓶不溶,不代表发酵罐不溶,摇瓶和发酵罐完全是两码事。祝顺利。
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#甜#[使用道具]
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会不会你的菌里参杂了溶源菌?有感染么?
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summerxx[使用道具]
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不太像,摇瓶小试做的没问题。
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ero11[使用道具]
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1.诱导后溶菌,首先考虑是不是操作上出了问题。或者发酵过程参数波动很大,例如压力,PH等的影响;
2.诱导以后OD不长,有可能是诱导剂的用量太高,还有你诱导的温度和诱导剂的加入方法有时候也会有影响;
3.生长多久以后开始诱导?罐体是否有死角没有处理干净?
4.诱导时间把握不对
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yayya[使用道具]
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一般溶菌现象可能是噬菌体污染了,参照噬菌体污染的解决办法。这个问题解决后,后面就不是问题了
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嗅嗅[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 ero11 于 2016-2-16 16:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1.诱导后溶菌,首先考虑是不是操作上出了问题。或者发酵过程参数波动很大,例如压力,PH等的影响;
2.诱导以后OD不长,有可能是诱导剂的用量太高,还有你诱导的温度和诱导剂的加入方法有时候也会有影响;
3.生长多久以后开始诱导?罐 ...

您好,请问您所说的操作上的问题指的是?  
压力基本没变化,PH在7左右。有时候升到7.2、7.3。
IPTG终浓度0.1-0.15,直接倒进去的。
生长四五个小时开始诱导的。
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8
 
我们OD能做到240,补料培养

=========================

太猛了吧  怎么搞得啊
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QUOTE:
原帖由 NBA 于 2016-2-16 16:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1.诱导1、2个小时溶解,各种可能都有,比如,其代谢产物对自身细胞有破坏作用,产生溶菌酶,发酵条件不合适等,
2.大肠发酵0D做到100多很正常也很普遍,培养基及补料是实现高密度发酵的主要因素,这个慢慢摸索吧,主要补料。补料速度,补 ...

我该如何解决这问题呢?  能不能指点一下方向?
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moonlight[使用道具]
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可能污染了烈性噬菌体了
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