小中大【求助】pNPP法测脂肪酶活
这几天用的pNPP法测定脂肪酶活时，借鉴的是华中科技大学舒正玉博士论文《黑曲霉脂肪酶的酶学性质、基因克隆与表达及结构预测》中的方法：溶液 A（比色法测定脂肪酶活力）：准确称量 0.062 g pNPP 加到 10 ml 异丙醇中，室温下超声波处理 6 min，使 pNPP 完全分散到异丙醇中，整个溶液呈乳白色。 溶液 B（比色法测定脂肪酶活力）：1.51 g Tris 完全溶解到 200 ml 蒸馏水中，依次加入 1 ml Triton-X100，0.25 g 阿拉伯胶，0.72 ml 浓盐酸，磁力搅拌器混匀，pH 计测量，用稀盐酸调节 pH 值到 7.5，定容至 250 ml。4 ℃保存。
然后问题出现了，在溶液A+B 混匀后始终是透光率很低的溶液，用分光光度计方法测定时，很难得出可靠的吸光值。
之前找过虫友问了，特别热情（我也不好意思多番打扰人家），他方法中加了脱氧胆酸盐，我的没有。他说在加入Triton-X100 后就变澄清了，但是我的加了也没变化。找了好多帖子看了，都没找到原因及解决方法。有的帖子也是类似问题，但是在各位一番评论指导后，帖主就不管了，看帖子的人无从得知解决措施。
so，希望有经验的虫友们指点指点，检测方法不准，试验开展不动啊。
