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标题:【求助】蛋白酶菌株酶活问题

txwuyan[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白酶菌株酶活问题

产蛋白酶菌株在酪蛋白琼脂上透明圈与菌落直径之比挺大，转接奶粉培养基摇瓶培养酶活却很小，是不是因为培养基成分变了引起的还是要考虑接种量、温度、pH、培养时间、转速等因素，底物诱导或产物阻遏的问题，请高手指点!


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2016-2-16 22:25
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standbyme[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
透明圈大只能作为筛选的一个参考，不能说透明圈大，酶活就大的，还是要测定到的酶活为准
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guagua[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
产蛋白酶菌株的筛选透明圈的大小与加入的筛选物多少关系密切。
楼主在筛选过程中加入的酪蛋白的多少会影响透明圈的大小，估计是楼主平板筛选时加入的比较少，所以透明圈比较大~~
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milkdog[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是楼主在筛选高产菌株。如果是这样的话，表型延迟可能需要考虑一下！
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kulee[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以用酶标仪具体测一下。透明圈不是很准。要不你可以多测几下。。看看
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yapuyapu[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主你在摇瓶培养的时候氮源是不是只用了奶粉，建议你考虑下培养基中加一部分蛋白胨或者无机氮源，以供菌体前期生长用
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october7[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主  这个必须测定蛋白酶活力，这个很简单啊  就有国标可用，
而且 培养基用奶粉 代价也太大了吧，玉米粉我们用的 就非常好啊
而且成本也很低的，换一下 试试
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lagua123[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
酪蛋白平板筛选法只是反应蛋白酶活力的一个初筛标准，需要进一步确定其蛋白酶活力是否真高；
如果确实高，需要优化你的液态培养条件，包括培养基、培养工艺等；
另外，强调一点，固态培养产酶和液态培养产酶条件差别很大，也与菌株特性相关，常常需要专用菌株。
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yyaxw84[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也在在做蛋白酶菌种的筛选，发现酶活跟透明圈有一定关系但不是绝对的，有些菌株有透明圈却没有酶活
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gogo[使用道具]
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发表于 2016-2-16 22:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的也是没有发现水解圈，但是能测到酶活。
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