小中大首先个人觉得HILIC不可能取代反相色谱 (回答6楼的),尤其是在药物分析领域.因为在这个领域多数被分析物都是非极性或弱极性的.但它在分析极性物质的方面有着无可替代的优势!这些优势不是反相离子对色谱所能比较的.
其实光从名字来看,反相离子对色谱本身就是用反相的保留原理来解决正相分离的问题.就好象要找一个打扮得花枝招展的男人来扮演一个美女一样.若是找得合适,打扮得也得体,可能会取得一定的效果.但为什么不找一个真正的美女呢?
本人用过一次反相离子对色谱.觉得最大的缺点就是重显性不好,峰型也时好时坏.主要原因就是离子配对试剂的量很难掌握.不同浓度的样品用同一浓度的试剂在retention time 上都会有差别.而且每次平衡柱子都要很长时间,要不然结果更差.唯一的好处就是只需要加离子配对试剂(季铵盐或磺酸盐),用普通的反相色谱柱就可以分析离子化(通常极性很大)的物质了.
本人用过Merck 的Zic-HILIC. 主要分析血浆中的,或细胞的代谢产物.其中大多数都是很小的极性物质.只要gradient program 设的好.分离和保留结果会很好.而且重显性也不错.其实HILIC的保留原理和反相改性柱(如Polar Embedded Group)是有本质区别的.说俗了就是反相改性柱是男拌女装,而HILIC就是带点儿男人味儿的美女!
HILIC还有一个最大的优点就是能与MS联用.因为现在的趋势就是LC-MS.MS作为检测器比UV的优势我就不想多说了.而且MS也不再是什么高不可及的仪器了.为了配合他,为什么不找一个真正的"美女"呢!
当然"美女"的身价是不菲的.而且有时"美"得有点儿过了.对小的极性物质保留太强,导致峰型变宽,拖尾.
总结:反相离子对色谱是没有办法中的办法,现在找到办法了,为什么不用呢?(虽然这个办法暂时有点儿贵)