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标题:【求助】用紫外吸收法测药物最小抑菌浓度（MIC)

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发表于 2016-3-7 11:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】用紫外吸收法测药物最小抑菌浓度（MIC)

我现在用试管稀释法做精油的MIC（最小抑菌浓度），无法目测浑浊度，老师建议用紫外吸收测细菌生长状况，可是我将菌液稀释至0.5麦比后在紫外上测吸光度从520nm到650nm都没有明显吸收。我不是做微生物的，请教一下这是怎么回事？
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发表于 2016-3-7 11:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的空白对照是什么,用什么来对光度计调零的?
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 小中大


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原帖由 555444 于 2016-3-7 11:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你的空白对照是什么,用什么来对光度计调零的?

是用肉汤培养基做对照调零的
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 小中大


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原帖由 vcve 于 2016-3-7 11:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

是用肉汤培养基做对照调零的

对照组应和样品组一起在摇床培养，吸取菌液不用稀释直接测定就好
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 小中大


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原帖由 555444 于 2016-3-7 11:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

对照组应和样品组一起在摇床培养，吸取菌液不用稀释直接测定就好

不稀释会不会太浓了，我现在还没找到最大吸收波长是多少。菌液必须得摇床培养才行吗？
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 小中大


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原帖由 vcve 于 2016-3-7 11:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不稀释会不会太浓了，我现在还没找到最大吸收波长是多少。菌液必须得摇床培养才行吗？

不用摇床也可以的，你本来就是测定菌液的浓度，除非是浓度太浓超出了光度计量程，不然一般很少稀释，最大吸收峰你查下文献看别人的是多少
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 小中大


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原帖由 555444 于 2016-3-7 11:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不用摇床也可以的，你本来就是测定菌液的浓度，除非是浓度太浓超出了光度计量程，不然一般很少稀释，最大吸收峰你查下文献看别人的是多少

文献中报道600nm、610nm还有一个是540nm，我认为就是测那个OD600。我只是做金葡和大肠杆菌，我将520-650nm波段都扫了没有吸收。我想用紫外吸收数值来支持我的药物的确抑菌并且找出最低抑菌浓度（MIC），需要做生长曲线吗?
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 小中大


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原帖由 vcve 于 2016-3-7 11:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

文献中报道600nm、610nm还有一个是540nm，我认为就是测那个OD600。我只是做金葡和大肠杆菌，我将520-650nm波段都扫了没有吸收。我想用紫外吸收数值来支持我的药物的确抑菌并且找出最低抑菌浓度（MIC），需要做生长曲线吗? ...

原来我也做的金黄个大肠，600nm吸收峰，做了12h的生长曲线，这样看起来直观一些
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原帖由 555444 于 2016-3-7 11:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

原来我也做的金黄个大肠，600nm吸收峰，做了12h的生长曲线，这样看起来直观一些

我再试试吧，可能是放法问题，那菌液浓度过高会不会影响吸收，还有就是，我的药液为乳状不能直接测紫外，得离心，是不是细菌就下沉了。
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原帖由 vcve 于 2016-3-7 11:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我再试试吧，可能是放法问题，那菌液浓度过高会不会影响吸收，还有就是，我的药液为乳状不能直接测紫外，得离心，是不是细菌就下沉了。

离心菌体应该是有沉下去了，这做吸光度有影响
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