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标题:【求助】菌种保存与复活

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发表于 2016-3-8 14:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】菌种保存与复活

怎样用甘油法保存菌种呢？具体的步骤是什么？保存后怎样让菌种活化？越详细越好。谢谢各位！
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金丝猴[使用道具]
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发表于 2016-3-8 14:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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2016-3-8 14:51
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8黑眼圈8[使用道具]
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发表于 2016-3-8 14:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
菌种的保存有多种方法：甘油管冷冻保藏法、真空冷冻干燥法、液氮冷冻保藏法。
甘油管冷冻保藏法的具体步骤（供参考）：
1.配制30%甘油（100%甘油：无菌水=3:7），高压灭菌后备用；
2.取lEP管一只，用接种环无菌刮取菌落若干，涮洗在盛有PBS的EP管中（也可用PBS洗涤培养基上的菌落制成悬液，再吸取悬液置于EP管中）；
3.在盛有菌悬液的EP管中加等量30%甘油；
4.封盖好，作好标记，置于-70℃冻存。
也可以用生理盐水取代PBS。
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purrr[使用道具]
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发表于 2016-3-8 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
灭菌的30%的甘油，培养至对数期的菌液1：1混匀，至于-80℃保存即可。菌种活化在适宜的固体培养基上划线培养即可。
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vtongli[使用道具]
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发表于 2016-3-8 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大学微生物实验课本，自己去翻
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发表于 2016-3-8 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
四楼的做法可以
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发表于 2016-3-8 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
希望对你有帮助！操作过程中一定要注意无菌，否则菌种污染了后续实验就会很麻烦！
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月牙牙[使用道具]
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发表于 2016-3-8 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
菌种的保存有多种方法：甘油管冷冻保藏法、真空冷冻干燥法、液氮冷冻保藏法。
甘油管冷冻保藏法的具体步骤（供参考）：
1.配制30%甘油（100%甘油：无菌水=3:7），高压灭菌后备用；
2.取lEP管一只，用接种环无菌刮 ...

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放在－21℃保存可以吗？实验室好像没有－80
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发表于 2016-3-8 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
取700微升菌液，加700微升60%甘油，-80℃保存。
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发表于 2016-3-8 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
放在－21℃保存可以吗？实验室好像没有－80
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-20℃可短期保存，如需长期保存得-70℃或-80℃？前面的操作完成的顺利吗？
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