【求助】电泳图条带W状是肿么回事？

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标题:【求助】电泳图条带W状是肿么回事？

seven7[使用道具]
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发表于 2016-3-10 16:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们在做基因型鉴定。有WT、杂合子、纯合子3种基因型（400~700bp）。用的1.2%的琼脂糖凝胶，上样10uL。电泳120V，40min。之前很好，这次就这样的条带，换了电泳槽的缓冲液也没解决。第一条是MAKER，跑的也不好。大家帮我分析下。

附件

2016-3-10 16:00

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chenshuanhe[使用道具]
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发表于 2016-3-10 16:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从你这个图上来看，你的marker跑开了，只是所有的样都弯曲了，有两个方面的可能原因：1.胶浓度较高，关键是没有混匀就凝固了，导致凝胶在缓冲液里分布不均，你试试用1%的浓度配胶，同时注意摇匀后灌胶；2.电压不稳，导致跑胶过程中条带歪曲，也不用那么高的电压跑的，你试试恒流跑20—30mA，恒压显示一般为50-60V(这个跟电泳槽有关，具体的数据看你的电泳槽说明）。希望对你有帮助

vtongli[使用道具]
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发表于 2016-3-10 16:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 chenshuanhe 于 2016-3-10 16:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
从你这个图上来看，你的marker跑开了，只是所有的样都弯曲了，有两个方面的可能原因：1.胶浓度较高，关键是没有混匀就凝固了，导致凝胶在缓冲液里分布不均，你试试用1%的浓度配胶，同时注意摇匀后灌胶；2.电压不稳，导致跑胶过程中条带歪 ...

有一个疑问，如果是胶浓度的问题，那有可能全部是规则的w吗？

yonger[使用道具]
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