【求助】求助

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标题:【求助】求助

leifengta[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我刚开始养3T3-L1细胞，长得挺好的！可是就是会经常出现莫名其妙的污染，不知道什么原因。我当天中午进行细胞传代，第二天看长得好好的。第三天早上看也长得挺好的，可是到了晚上却出现了污染！培养液里飘着絮状物，还有很多黑点！

woshituzhu[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

确认用的培养基是否有问题,若没有很可能就是操作有细节没注意到。自己留心下就能解决。

zhenxin[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

支原体是一种大小仅为0.2~0.3 μm，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22-0.45 μm）的原核生物，在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明：当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染后，细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。

kuaizige[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

支原体污染，建议使用支原体清除试剂，可以联系我。

我是一片云[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我是新手，最近老是污染，感觉操作也和以前差不多，可就是会污染。现在甚至觉得看什么细胞都有问题。

wiwi[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

换新的培养基培养下试试，尤其血清，能向别人借一批不同的加入试试，看长了后是否还会污染。

xevin[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

培养基、培养箱、细胞房、消消毒。

zhenxin[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

再复苏细胞或者传代细胞，可以试着细胞上清培养液涂平板看看。絮状很可能是真菌，夏天确实容易染菌，需要弄清染什么菌，确定自己无菌操作没问题。就需要考虑环境。如果是真菌就很痛苦，可能会有孢子原因。看看其他人是否一样染菌，如果一样，可能环境污染，培养箱污染。如果只是自己，可能操作问题，或者自己物品无菌准备不彻底。如果培养基添加了抗生素，也可以购买真菌抗生素添加。

zhezhe[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

整个试验流程都要注意无菌，每个步骤间，多用酒精喷在手上，台子上，消毒，，我到现在一次污染都没有过。
培养基也要加适当抗生素，现在一般买的培养基都有的吧？不知道你用的是什么培养基。
总之，我的经验是多用酒精喷手，得空就喷，台子也喷，没事儿也喷- -

xue258[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

整个试验流程都要注意无菌，每个步骤间，多用酒精喷在手上，台子上，消毒，，我到现在一次污染都没有过。
培养基也要加适当抗生素，现在一般买的培养基都有的吧？不知道你用的是什么培养基。
总之，我的经验是多用 ...

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这个主意不错，记下了，最近准备养PC12，希望顺顺利利妥妥当当的。

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