【求助】求教好转染的小鼠细胞系

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标题:【求助】求教好转染的小鼠细胞系

079777chao[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我想请问下什么小鼠细胞系比较好做瞬时转染？小鼠中是否也有像293T那样的工具细胞（瞬时转染效率能达到70%以上的）我们主要是用FugeneHD或Lipofectamin LTX转染。万分感谢！

shenkunjie[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室用Neuro2acells做瞬时转染，FugeneHD可以达到90%以上。你可以试一试。

xue258[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

CHO细胞，好转染而且蛋白表量高

079777chao[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 xue258 于 2016-3-12 11:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
CHO细胞，好转染而且蛋白表量高

谢谢！CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary)吗？我查了下看转染效率能达到60%左右。我想表达shRNA。

我们这表好像要不到这个细胞，但仍然非常感谢！

079777chao[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 shenkunjie 于 2016-3-12 11:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我们实验室用Neuro2acells做瞬时转染，FugeneHD可以达到90%以上。你可以试一试。

非常感谢！我查文献Neuro2a用lipo 2000转染效率大约在30%左右，用慢病毒也不好感染，FugeneHD可以达到这么高？！是不是你们细胞的细胞株比较好啊？

sobi[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 079777chao 于 2016-3-12 11:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

非常感谢！我查文献Neuro2a用lipo 2000转染效率大约在30%左右，用慢病毒也不好感染，FugeneHD可以达到这么高？！是不是你们细胞的细胞株比较好啊？

转染是个技术活。必须控制多个影响因素，细胞培养状态好是必须的。Roche新款的X-treme DNA HP也有很好的转染效率。LF2000我们没有试过Neuro2a cells的转染，不知道它的转染效率。我们实验室发表多篇文章都有转染的应用。

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发表于 2016-3-12 11:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

首先，你是不是应该搞清楚，你转shRNA的目的是啥，不能抓个细胞就转吧？
再者，你是不是要考虑下你目的基因的表达，不同细胞的特定的基因表达就不一样啊？
然后，你再考虑转染效率吧。否则，转了，效率高，不能说明你的问题怎么办？

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发表于 2016-3-12 11:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

NEU2A 是转染效率非常高的细胞，我们可以转到90%以上。但是选择细胞系，还是要看你做的实验来。

079777chao[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 1221 于 2016-3-12 11:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
首先，你是不是应该搞清楚，你转shRNA的目的是啥，不能抓个细胞就转吧？
再者，你是不是要考虑下你目的基因的表达，不同细胞的特定的基因表达就不一样啊？
然后，你再考虑转染效率吧。否则，转了，效率高，不能说明你的问题怎么办？ ...

呵呵，同学你回复的很逻辑！谢谢你！
我当时问这个问题是想试knock down不下来到底是我靶点设计的不好，还是转染效率的问题。
现在这个问题几经解决，我改用慢病毒系统后，转染效率很高了。已经达我的实验目的。

不好意思现在才回复，当时很久没有看木虫了，谢谢你！希望不是太迟。

DDD[使用道具]
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发表于 2016-3-12 11:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我要做小鼠C2C12骨骼肌细胞系，我想问下这个好转染么？实在是菜鸟一枚。。

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